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pCR-BluntII-TOPO-USP22质粒来源
点击次数：193发布时间：2020/11/4 13:12:20
更新日期：2024/10/16 15:40:08
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
参数规格
启动子:Tac
复制子:pBR322
质粒分类:大肠杆菌载体；pGEX系列表达质粒
质粒大小:4969bp
质粒标签:N-GST, N-thrombin
克隆菌株:DH5a
培养条件:37度
表达宿主:大肠杆菌BL21 DE3
培养条件:37℃，有氧，LB
诱导方式:IPTG或乳糖及其类似物
5＇测序引物:pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG
3＇测序引物:pGEX3: CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG
备注:可用GST亲和柱纯化重组蛋白
质粒宿主：大肠杆菌；哺乳细胞；酵母菌；噬菌体；乳酸菌；枯草杆菌；丝状真菌；金黄色葡萄球菌等
质粒用途：蛋白表达；基因编辑；诱导染色；定位杂交等
片段类型：ORF；cDNA；shRNA；sgRNA；ncRNA；miRNA；cirRNA等
片段物种：空载体
原核抗性：Amp
pCR-BluntII-TOPO-USP22质粒来源是一个大肠杆菌表达载体，Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达，LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达，防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割，再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。
产品相册
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操作流程
pCR-BluntII-TOPO-USP22质粒来源到货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
公司介绍
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
B-5-3-2118,Guanghua Road, Minhang District, Shanghai
Tian Lin Branch of Shanghai Rural Commercial Bank
Tianlin Road No. 588, Xuhui District, Shanghai
KA&M Pharmacogenetics is one of the few companies working in the molecular biology field.
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