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pSuper-TLR4shRNA1-GFP-Neo
点击次数：243发布时间：2020/11/18 11:02:09
更新日期：2024/12/3 11:29:54
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
使用方法
pSuper-TLR4shRNA1-GFP-Neo收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
pSuper-TLR4shRNA1-GFP-Neo是一个大肠杆菌表达载体，Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达，LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达，防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割，再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。
产品相册
pSuper-TLR4shRNA1-GFP-NeoAddgene NGS results
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TCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAA
TAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAA……欢迎免费索取更多详细完整图谱资料。
操作流程
pSuper-TLR4shRNA1-GFP-Neo到货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pSuper-TLR4shRNA1-GFP-Neo转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
pSuper-TLR4shRNA1-GFP-Neo转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
10%福尔马林中性固定液
哈瑞氏苏木素染色液（含汞氧化型）500ml瓶细胞核染色
2500ml瓶
5000ml瓶
哈瑞氏苏木素染色液（非含汞氧化型）500ml瓶细胞核染色
2500ml瓶
5000ml瓶
伊红Y染色液（水溶性）500ml瓶细胞浆染色
2500ml瓶
5000ml瓶
伊红Y染色液（醇溶性）500ml瓶细胞浆染色
2500ml瓶
5000ml瓶
哈瑞氏苏木素-伊红（含汞氧化型）500ml*4套细胞浆染色
2500ml*4套
5000ml*4套
哈瑞氏苏木素-伊红（非含汞氧化型）500ml*4套细胞浆染色
2500ml*4套
5000ml*4套
HE分化液500ml*4套分化用
2500ml*4套
5000ml*4套
HE返蓝液500ml*4套返蓝用
2500ml*4套
5000ml*4套
Masson 三色染色液50ml*6套结缔组织染色染色
Pollak三色染色液50ml*3套结缔组织染色染色
V.G染色液50ml*4套肌纤维和胶原纤维染色
弹力纤维染色液50ml*4套弹力纤维染色
网状纤维染色液50ml*6套网状纤维染色
PTAH染色液50ml*3套横纹肌染色
尼氏体染色液50ml*4套神经组织尼氏体染色
神经元染色液50ml*6套神经元及神经纤维染色
神经髓鞘染色液50ml*4套神经髓鞘染色
苏丹III染色液50ml*3套脂肪组织染色
油红O染色液50ml*3套脂肪组织染色
PAS染色液50ml*2套糖原基底膜染色
粘液卡红染色液50ml*4套粘液组织染色
阿利新蓝染色液50ml*2套酸性物质组织染色
AB-PAS染色液50ml*4套混合性粘液组织染色
普鲁士蓝铁染色液50ml*2套含铁血黄素组织染色
黑色素染色液50ml*4套黑色素组织染色
淀粉样物质染色液50ml*5套淀粉样组织染色
革蓝氏染色液50ml*4套细菌染色
结核菌染色液50ml*4套抗酸染色
HP螺旋杆菌染色液50ml*6套螺旋杆菌染色
六胺银染色液50ml*6套肾小球基底膜染色
核仁组成嗜银蛋白染色液50ml*2套核仁组成嗜银蛋白染色
瑞氏染色液500ml*3套骨髓血细胞染色
巴士染色液500ml*2套细胞学染色
肥大细胞染色液50ml*4套肥大细胞染色
DNA和RNA染色液(MGP)5ml*6套
革兰氏染色液50ml*4套细菌染色
病毒包涵体染色液50ml*4套病毒包涵体染色液
核固红染色液100ml套细胞核染色
脂褐素染色液50ml*4套脂褐素 黑色素
瑞氏-吉姆萨复合染色液50ml*2套骨髓血细胞染色
公司介绍
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
B-5-3-2118,Guanghua Road, Minhang District, Shanghai
Tian Lin Branch of Shanghai Rural Commercial Bank
Tianlin Road No. 588, Xuhui District, Shanghai
