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pBOB-EF1-FastFUCCI-Puro
点击次数：235发布时间：2020/11/18 16:25:38
更新日期：2024/12/3 11:30:06
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
使用方法
pBOB-EF1-FastFUCCI-Puro收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
pBOB-EF1-FastFUCCI-Puro是一个大肠杆菌表达载体，Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达，LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达，防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割，再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。
产品相册
pBOB-EF1-FastFUCCI-PuroAddgene NGS results
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CCTCACTCGGCGCGCCAGTCCTCCGATAGACTGCGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTT
GCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCA
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CAGTTCGGTGTAGGTCGTTCGCTCCAAGCTGGGCTGTGTGCACGAACCCCCCGTTCAGCCCGACCGCTGC
GCCTTATCCGGTAACTATCGTCTTGAGTCCAACCCGGTAAGACACGACTTATCGCCACTGGCAGCAGCCA
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CGGCTACACTAGAAGAACAGTATTTGGTATCTGCGCTCTGCTGAAGCCAGTTACCTTCGGAAAAAGAGTT
GGTAGCTCTTGATCCGGCAAACAAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTTTTTTGTTTGCAAGCAGCAGATTA
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TCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAA
TAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAA……欢迎免费索取更多详细完整图谱资料。
操作流程
pBOB-EF1-FastFUCCI-Puro到货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pBOB-EF1-FastFUCCI-Puro转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
pBOB-EF1-FastFUCCI-Puro转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
MZ6713pCDNA3.1-GABBR1询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6714pECMV-C1orf131-3×FLAG询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6715pDsRed2-CAVIN1询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6716pCDNA3.1-GRIA1(1同义突变)询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6717pCDH-CMV-GSTA1-EF1-copGFP询价慢病毒基因CDS人
MZ6718pCDNA3.1-LGI1询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6719pECMV-HDAC2-3×FLAG(2同义突变)询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6720pCDNA3.1-GRIN1(2同义突变)询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6721pCMV-Myc-BECN1询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6722pLKO.1-shTAZ询价慢病毒shRNA人
MZ6723pmirGLO-ATP5G1(3UTR)询价哺乳细胞启动子人
MZ6724pmirGLO-ATP5I(3UTR)询价哺乳细胞启动子人
MZ6725pET29a-P15 BID询价大肠杆菌基因CDS
MZ6726pECMV-KIF15-3×FLAG询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6727pECMV-3×FLAG-B4GALT2询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6728pCDNA3.1-CD22(1同义突变)询价哺乳细胞基因CDS人
MZ6729pmirGLO-ATP5G3(3UTR)询价哺乳细胞启动子人
MZ6730pBOB-EF1-FastFUCCI-Puro询价基因CDS
MZ6731pGL2-Basic询价哺乳细胞启动子空载体
MZ6732pOTB7-POLR2L(1同义突变)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6733pCDNA3.0-FLAG-N询价哺乳细胞基因CDS空载体
MZ6734pCMV-SPORT6-GAGE5询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6735pCMV-SPORT6-ZFAND3询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6736pCMV-SPORT6-FAIM询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6737pCMV-SPORT6-HLA-DMB(1点突变)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6738pCMV-SPORT6-CLDN1(1同义突变)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6739pCMV-SPORT6-RNF6询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6740pCMV-SPORT6-TERF2(1-840bp)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6741pCMV-SPORT6-SYNGR2询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6742pCMV-SPORT6-MITF询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6743pCMV-SPORT6-GDAP1询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6744pCMV-SPORT6-RAMAC询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6745pCMV-SPORT6-FAM174A询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6746pCMV-SPORT6-GGH询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6747pCMV-SPORT6-TYR询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6748pCMV-SPORT6-IGLL1询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6749pCMV-SPORT6-KIAA0907询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6750pCMV-SPORT6-C20orf74(点插入移码)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6751pCMV-SPORT6-SNAI1询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6752pCMV-SPORT6-TBC1D5询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6753pCMV-SPORT6-ALDH1L1 询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6754pCMV-SPORT6-PEPD(1点突变)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6755pCMV-SPORT6-MRPL50询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6756pCMV-SPORT6-C12orf10询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6757pCMV-SPORT6-THAP5询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6758pCMV-SPORT6-ZNF177询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6759pCMV-SPORT6-ZGNS询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6760pCMV-SPORT6-FRK询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6761pCMV-SPORT6-CEACAM21询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6762pCMV-SPORT6-RAB37询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6763pCMV-SPORT6-GJB3询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6764pCMV-SPORT6-ACADSB(1点突变)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6765pCMV-SPORT6-NFS1询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6766pCMV-SPORT6-GOLGA7(1同义突变)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6767pCMV-SPORT6-ELP4询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6768pCMV-SPORT6-DAPP1询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6769pCMV-SPORT6-DTL询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6770pCMV-SPORT6-RPL14询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6771pCMV-SPORT6-SERBP1询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6772pCMV-SPORT6-FRYL询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6773pCMV-SPORT6-ABHD16A(2同义突变)询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6774pCMV-SPORT6-FAS询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6775pCMV-SPORT6-CLN6询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6776pCMV-SPORT6-TTI1询价大肠杆菌基因CDS人
MZ6777pCMV-SPORT6-KCTD12询价大肠杆菌基因CDS人
公司介绍
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
B-5-3-2118,Guanghua Road, Minhang District, Shanghai
Tian Lin Branch of Shanghai Rural Commercial Bank
Tianlin Road No. 588, Xuhui District, Shanghai
