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pCMV-SPORT6-TUBB4B
点击次数：233发布时间：2020/11/19 13:14:39
更新日期：2024/10/16 15:41:20
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
使用方法
pCMV-SPORT6-TUBB4B收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
pCMV-SPORT6-TUBB4B是一个大肠杆菌表达载体，Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达，LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达，防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割，再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。
产品相册
pCMV-SPORT6-TUBB4BAddgene NGS results
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TCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAA
TAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAA……欢迎免费索取更多详细完整图谱资料。
操作流程
pCMV-SPORT6-TUBB4B到货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCMV-SPORT6-TUBB4B转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
pCMV-SPORT6-TUBB4B转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
纤维素透析袋100-50010mm0.32ML／CM1米/卷
纤维素透析袋100-50016mm0.79ML／CM1米/卷
纤维素透析袋100-50024mm1.8ML／CM1米/卷
纤维素透析袋100-50031mm3.1ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500-100010mm0.32ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500-100016mm0.79ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500-100024mm1.8ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500-100031mm3.1ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500010mm0.32ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500016mm0.79ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500024mm1.8ML／CM1米/卷
纤维素透析袋500031mm3.1ML／CM1米/卷
纤维素透析袋1000010mm0.32ML／CM1米/卷
纤维素透析袋1000016mm0.79ML／CM1米/卷
纤维素透析袋1000024mm1.8ML／CM1米/卷
纤维素透析袋1000031mm3.1ML／CM1米/卷
纤维素透析袋2000010mm0.32ML／CM1米/卷
纤维素透析袋2000016mm0.79ML／CM1米/卷
纤维素透析袋2000024mm1.8ML／CM1米/卷
纤维素透析袋2000031mm3.1ML／CM1米/卷
纤维素透析袋5000010mm0.32ML／CM1米/卷
纤维素透析袋5000016mm0.79ML／CM1米/卷
纤维素透析袋5000024mm1.8ML／CM1米/卷
纤维素透析袋5000031mm3.1ML／CM1米/卷
纤维素透析袋10000010mm0.32ML／CM1米/卷
纤维素透析袋10000016mm0.79ML／CM1米/卷
纤维素透析袋10000024mm1.8ML／CM1米/卷
纤维素透析袋10000031mm3.1ML／CM1米/卷
纤维素透析袋30000016mm0.79ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋100018mm1.0ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋100038mm4.6ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋100045mm6.4ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋200018mm1.0ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋200038mm4.6ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋200045mm6.4ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋350018mm1.0ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋350045mm6.4ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋350053mm9.3ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋800012mm0.45ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋800024mm1.8ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋800032mm3.3ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋800040mm5.1ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋800050mm8.0ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋1000012mm0.45ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋1000024mm1.8ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋1000032mm3.3ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋1000045mm 6.4ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋2500012mm0.45ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋2500028mm2.5ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋2500035mm3.7ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋5000010mm0.32ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋5000012mm0.45ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋5000028mm2.5ML／CM1米/卷
再生纤维素透析袋5000035mm3.7ML／CM1米/卷
普通型透析袋350025mm5米/卷
普通型透析袋350034mm5米/卷
普通型透析袋350044mm5米/卷
普通型透析袋700025mm5米/卷
普通型透析袋700034mm5米/卷
普通型透析袋700044mm5米/卷
普通型透析袋8000-1400025mm5米/卷
普通型透析袋8000-1400034mm5米/卷
普通型透析袋8000-1400044mm5米/卷
普通型透析袋8000-1400077mm5米/卷
透析夹4cm只
透析夹6cm只
透析夹8cm只
公司介绍
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
B-5-3-2118,Guanghua Road, Minhang District, Shanghai
Tian Lin Branch of Shanghai Rural Commercial Bank
Tianlin Road No. 588, Xuhui District, Shanghai
