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pLVX-EGFR-FLAG-Puro
点击次数：188发布时间：2020/11/24 14:25:50
更新日期：2024/12/3 11:30:18
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
使用方法
pLVX-EGFR-FLAG-Puro收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
pLVX-EGFR-FLAG-Puro是一个大肠杆菌表达载体，Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达，LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达，防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割，再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。
产品相册
pLVX-EGFR-FLAG-PuroAddgene NGS results
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TAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAA……欢迎免费索取更多详细完整图谱资料。
操作流程
pLVX-EGFR-FLAG-Puro货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pLVX-EGFR-FLAG-Puro转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
pLVX-EGFR-FLAG-Puro转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
QMS-h1160Mcf-7/adr,人乳腺癌阿霉素耐药细胞株规格： 1*10 6
QMS-h1161Bcap-37,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1162BT-20,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1163BT474,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1164BT-549,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1165HS578T,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1166MCF-7,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1167MDA-MB-231,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1168MDA-MB-361,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1169MDA-MB-435,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1170MDA-MB-435s,人乳腺癌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1171HSF,人皮肤成纤维细胞规格： 1*10 6
QMS-h1172HOS,人骨肉瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1173MG-63,人骨肉瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1174SJSA-1,人骨肉瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1175sw1353,人骨肉瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1176A673,人横纹肌瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1177A-204（A204）,人横纹肌肉瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1178RD,人横纹肌肉瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1179A875,人黑色素瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1180M14 ,人黑色素瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1181MV3,人黑色素瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1182WM266-4,人黑素瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1183Jurkat，Clone E6-1 ,人T淋巴细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1184MEG-01 ,人成巨核细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1185HEL,人红白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1186TF-1,人红白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1187SUP-B15,人急淋白血病细胞系规格： 1*10 6
QMS-h1188REH,人急性非B非T淋巴细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1189MT-4,人急性淋巴母细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1190MOLT-4,人急性淋巴母细胞性白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1191CCRF-CEM,人急性淋巴细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1192CEM/C1,人急性淋巴细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1193DAMI,人巨核细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1194A3 ,人淋巴细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1195K562,人慢性骨髓性白血病细胞系规格： 1*10 6
QMS-h1196AMO-1,人骨髓浆细胞瘤株规格： 1*10 6
QMS-h1197NCI-H929,人骨髓瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1198OPM2,人骨髓瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1199KCL-22,人慢性粒细胞白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1200KU812,人外周血嗜碱性白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1201HMEC-1,人微血管內皮細胞株规格： 1*10 6
QMS-h1202HL60,人早幼粒白血病细胞规格： 1*10 6
QMS-h1203HA-VSMC ,人主动脉血管平滑肌细胞规格： 1*10 6
QMS-h1204OCI-LY10,弥漫大B细胞淋巴瘤细胞 规格： 1*10 6
QMS-h1205RAMOS,人B淋巴细胞瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1206H9 ,人T淋巴瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1207NK-92,人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1208Karpas-299 ,人间变性大细胞淋巴瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1209Raji,人淋巴瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1210T2 (174xcem.T2 ),人淋巴母细胞规格： 1*10 6
QMS-h1211HUT-102,人皮肤T淋巴瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1212HUVEC ,人脐静脉内皮细胞规格： 1*10 6
QMS-h1213K562/ADR,K562耐阿霉素细胞株规格： 1*10 6
QMS-h1214HBMEC,人脑微血管内皮细胞规格： 1*10 6
QMS-h1215A172,人脑胶质瘤细胞规格： 1*10 6
QMS-h1216HS683,人脑胶质瘤细胞规格： 1*10 6
公司介绍
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
B-5-3-2118,Guanghua Road, Minhang District, Shanghai
Tian Lin Branch of Shanghai Rural Commercial Bank
Tianlin Road No. 588, Xuhui District, Shanghai
