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LentiCRISPRv2 neo
点击次数：219发布时间：2020/11/25 13:51:00
更新日期：2024/10/16 15:41:32
所 在 地：中国大陆
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详细内容
使用方法
LentiCRISPRv2 neo收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
LentiCRISPRv2 neo是一个大肠杆菌表达载体，Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达，LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达，防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割，再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。
产品相册
LentiCRISPRv2 neoAddgene NGS results
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TCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAA
TAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAA……欢迎免费索取更多详细完整图谱资料。
操作流程
LentiCRISPRv2 neo货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
LentiCRISPRv2 neo融化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
LentiCRISPRv2 neo融化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
mEA-65410鸡1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)elisa试剂盒
mEA-65411鸡13,14二氢15-酮前列腺素F2α(PGFM)elisa试剂盒
mEA-65412鸡17α-羟基孕烯醇酮(17α-HP)elisa试剂盒
mEA-65413鸡17β-雌二醇(17β-E2)elisa试剂盒
mEA-65414鸡1α羟化酶(1α-Hydroxylase)elisa试剂盒
mEA-65415鸡2,5寡腺苷酸合成酶2(OAS2)elisa试剂盒
mEA-65416鸡3-硝基络氨酸(3-NT)elisa试剂盒
mEA-65417鸡5羟色胺(5-HT)elisa试剂盒
mEA-65418鸡8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)elisa试剂盒
mEA-65419鸡Bcl-2相关X蛋白(BAX)elisa试剂盒
mEA-65420鸡BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)elisa试剂盒
mEA-65421鸡B细胞活化因子(BAFF/CD257)elisa试剂盒
mEA-65422鸡B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)elisa试剂盒
mEA-65423鸡B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa试剂盒
mEA-65424鸡c-fos(c-fos)elisa试剂盒
mEA-65425鸡CD3分子(CD3)elisa试剂盒
mEA-65426鸡CD4分子(CD4)elisa试剂盒
mEA-65427鸡CD8分子(CD8)elisa试剂盒
mEA-65428鸡CXC趋化因子配体1(CXCL1)elisa试剂盒
mEA-65429鸡CXC趋化因子配体2(CXCL2)elisa试剂盒
mEA-65430鸡D-乳酸(D-LA)elisa试剂盒
mEA-65431鸡E选择素(E-Selectin)elisa试剂盒
mEA-65432鸡Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)elisa试剂盒
mEA-65433鸡FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白(FRAP1)elisa试剂盒
mEA-65434鸡FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)elisa试剂盒
mEA-65435鸡I型前胶原N端前肽(PINP)elisa试剂盒
mEA-65436鸡I型胶原蛋白(ColⅠ)elisa试剂盒
mEA-65437鸡KLHL4(KLHL4)elisa试剂盒
mEA-65438鸡L苯丙氨酸解氨酶(PAL)elisa试剂盒
mEA-65439鸡MAX二聚化蛋白1(mxd1)elisa试剂盒
mEA-65440鸡Mx基因(Mx Gene)elisa试剂盒
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mEA-65442鸡P-MEEK1(P-MEEK1)elisa试剂盒
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mEA-65454鸡Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)elisa试剂盒
mEA-65455鸡Ⅰ型胶原C末端肽(CTX-Ⅰ)elisa试剂盒
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mEA-65457鸡Ⅰ型胶原α2链(COL1α2)elisa试剂盒
mEA-65458鸡Ⅱ型胶原(ColⅡ)elisa试剂盒
mEA-65459鸡一磷酸腺苷(AMP)elisa试剂盒
mEA-65460鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)elisa试剂盒
mEA-65461鸡三磷酸腺苷(ATP)elisa试剂盒
mEA-65462鸡丙二酰辅酶A(malonyl CoA)elisa试剂盒
mEA-65463鸡主要急性期蛋白(MAP)elisa试剂盒
mEA-65464鸡主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ)elisa试剂盒
mEA-65465鸡乙酰辅酶A羧化酶(AACase)elisa试剂盒
mEA-65466鸡二氢睾酮(DHT)elisa试剂盒
mEA-65467鸡二磷酸腺苷(ADP)elisa试剂盒
mEA-65468鸡二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)elisa试剂盒
mEA-65469鸡二酰甘油胆碱磷酸转移酶(CPT)elisa试剂盒
mEA-65470鸡传染性鼻炎(IC )elisa试剂盒
mEA-65471鸡传染性鼻炎抗体(IC Ab)elisa试剂盒
mEA-65472鸡低密度脂蛋白(LDL)elisa试剂盒
mEA-65473鸡低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)elisa试剂盒
mEA-65474鸡促性腺激素抑制激素(GnIH)elisa试剂盒
mEA-65475鸡促性腺激素释放激素(GnRH)elisa试剂盒
mEA-65476鸡促甲状腺激素(TSH)elisa试剂盒
mEA-65477鸡促食欲素A(OXA)elisa试剂盒
mEA-65478鸡催产素(OT)elisa试剂盒
mEA-65479鸡免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ)elisa试剂盒
mEA-65480鸡免疫球蛋白G1(IgG1)elisa试剂盒
mEA-65481鸡免疫球蛋白G2(IgG2)elisa试剂盒
mEA-65482鸡内质网应激相关蛋白CHOP(CHOP)elisa试剂盒
mEA-65483鸡凋亡相关因子(FAS/CD95)elisa试剂盒
mEA-65484鸡凝血酶原(PT)elisa试剂盒
mEA-65485鸡前列腺素(PG)elisa试剂盒
mEA-65486鸡前列腺素E(PGE)elisa试剂盒
mEA-65487鸡前列腺素E2(PGE2)elisa试剂盒
mEA-65488鸡前列腺素F2a(PGF2a)ELISA试剂盒
mEA-65489鸡副嗜血杆菌(HPG)ELISA试剂盒
mEA-65490鸡副猪嗜血杆菌(HPS)ELISA试剂盒
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mEA-65493鸡半胱氨酸蛋白酶10(Casp-10)ELISA试剂盒
mEA-65494鸡半胱氨酸蛋白酶12(Casp-12)ELISA试剂盒
mEA-65495鸡半胱氨酸蛋白酶13(Casp-13)ELISA试剂盒
mEA-65496鸡半胱氨酸蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒
mEA-65497鸡半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)ELISA试剂盒
mEA-65498鸡半胱氨酸蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒
mEA-65499鸡单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒
mEA-65500鸡单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒
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mEA-65510鸡卵黄蛋白原(VTG)ELISA试剂盒
mEA-65511鸡卵黄高磷蛋白(PVS)ELISA试剂盒
mEA-65512鸡去甲肾上腺素(NE)ELISA试剂盒
mEA-65513鸡受体相互作用蛋白1(RIP1)ELISA试剂盒
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mEA-65516鸡叶酸(FA)ELISA试剂盒
mEA-65517鸡叶黄素(Lutein)ELISA试剂盒
mEA-65518鸡同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒
mEA-65519鸡吡啶酚(PYD)ELISA试剂盒
mEA-65520鸡四环素(TTL)ELISA试剂盒
公司介绍
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
Shanghai Qi Ming Biotechnology Co., Ltd
B-5-3-2118,Guanghua Road, Minhang District, Shanghai
Tian Lin Branch of Shanghai Rural Commercial Bank
Tianlin Road No. 588, Xuhui District, Shanghai
