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土壤α-葡萄糖苷酶(Solid-α-Glucosidase,S-α-GC)试剂盒
点击次数:206发布时间:2022/3/3 15:17:11
更新日期:2024/12/3 11:30:42
所 在 地:中国大陆
产品型号:
优质供应
详细内容
土壤α-葡萄糖苷酶(Solid-α-Glucosidase,S-α-GC)试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意:正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
测定原理:
S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用每瓶加入6mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶,4℃保存;
样品处理
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | |||
风干土样(g) | 0.05 | 0.05 | |||
试剂一(μL) | 25 | 25 | |||
| 室温振荡混匀15min | ||||
试剂二(μL) | 400 |
| |||
蒸馏水(μL) |
| 400 |
| ||
试剂三(μL) | 500 | 500 |
|
混匀, 37℃振荡反应1h后,立即90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却10000g 25℃离心10min,取上清液
上清液(μL) | 500 | 500 |
试剂四(μL) | 1000 | 1000 |
充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-α-GC活力计算:
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =138.7×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:9.25×10-4 L;W:样本质量,0.05g。