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土壤α-葡萄糖苷酶(Solid-α-Glucosidase,S-α-GC)试剂盒

点击次数:206发布时间:2022/3/3 15:17:11

土壤α-葡萄糖苷酶(Solid-α-Glucosidase,S-α-GC)试剂盒

更新日期:2024/12/3 11:30:42

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:土壤α-葡萄糖苷酶(Solid-α-Glucosidase,S-α-GC)试剂盒

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详细内容


土壤α-葡萄糖苷酶(Solid-α-GlucosidaseS-α-GC)试剂盒说明书

                                     分光光度法50/24

 

   意:正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:                           

S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

 

测定原理:

S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。

 

自备用品

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)蒸馏水

试剂组成和配制

试剂一甲苯5mL×1瓶,4保存;(自备)

试剂粉剂×2瓶,-20保存;临用每瓶加入6mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20保存

试剂三:液体25mL×1瓶,4保存; 

试剂:液体50mL×1瓶,4保存;

 

样品处理

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

 

测定步骤:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g

0.05

0.05

试剂一(μL

25

25

 

室温振荡混匀15min

90℃振荡混匀15min

试剂二(μL

400

 

蒸馏水(μL

 

400

 

试剂三(μL

500

500

 

混匀, 37振荡反应1h立即90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失)流水冷却10000g 25℃离心10min,取上清液

上清液μL

500

500

试剂四μL

1000

1000

充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A计算ΔA=A测定管-A对照管每个测定管设一个对照管。

 

S-α-GC活力计算:

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。

 

单位的定义:每天g土样中产生1 μmol-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-α-GC活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =138.7×(ΔA+0.0027)

T:反应时间,1h=1/24d V反总:反应体系总体积9.25×10-4 LW:样质量,0.05g

 

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