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土壤木质素过氧化物酶（Soil lignin peroxidase，S-Lip）试剂盒
点击次数：196发布时间：2022/3/3 15:55:20
更新日期：2024/10/16 15:41:56
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
土壤木质素过氧化物酶（Soil lignin peroxidase，S-Lip）试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
木质素过氧化物酶（EC1.11.1.14）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，属于木质素降解酶系，在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理：
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛，在310nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿、震荡仪、甲苯。
试剂组成和配制：
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样风干，过30-50目筛。
测定操（在2mL EP管中依次加入下列试剂）：
|
| 对照管 | 测定管 |
| 土样（g） | 0.1 | 0.1 |
| 甲苯（μL） | 50 | 50 |
| 25℃静置15min | ||
| 试剂一（μL） |
| 750 |
| 蒸馏水（μL） | 750 |
|
| 试剂二（μL） | 450 | 450 |
| 试剂三（μL） | 300 | 300 |
| 30℃震荡反应3h，冰浴5min，12000g，4℃离心10min，取上清800μL，于1mL石英比色皿，测定310nm处吸光值，分别记为A对照和A测定，△A=A测定- A对照 | ||
酶活计算公式
酶活性定义：每克土壤每天氧化1nmol藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP活性（nmol/d/g 土样）= ×V反总÷W÷T= 1290×△A÷W
ε：藜芦醛摩尔消光系数：9300L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，1.5mL； W：样本质量，g；T：反应时间，3h
