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土壤酸性转化酶(Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒

点击次数:176发布时间:2022/3/3 16:17:44

土壤酸性转化酶(Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒

更新日期:2024/12/3 11:30:42

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:土壤酸性转化酶(Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒

优质供应

详细内容


土壤酸性转化酶Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒说明书

                                       
                                       分光光度法50/24

 

    意:正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-AIpH 4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶。


测定原理:

S-AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与AI活性成正比。

自备用品

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL玻璃比色皿蒸馏水


试剂组成和配制

试剂一:液体50mL×1瓶,4保存;

试剂粉剂×1瓶,4保存;临用加入25mL试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4保存;

试剂:液体20mL×1瓶,4保存


样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

 

测定步骤和加样表

 

试剂名称(μL

测定管

对照管

风干土样(g

0.1

0.1

试剂一

 

800

试剂二

800

 

混匀, 37准确水浴30min95℃水浴10min左右(盖紧,以防水分散失),流水冷却,

充分混匀(以保证浓度不变)10000g 25℃离心10min,取上清液

上清液

700

700

试剂三    

350

350

混匀,95℃水浴10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀, 510nm,蒸馏水调零,记录管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数)ΔA=A测定-A对照

 

 

 

 

S-AI计算:

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001x为标准品浓度(μg/mL),y为吸光值。

单位的定义:每天g土样中产生1mg还原糖定义为一个S-AI活力单位。

S-AIμg/d /g土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V反总÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)

V反总:反应体系总体积0.8mLT:反应时间,1/48d W:样质量,0.1g10001mg=1000μg

 

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