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土壤淀粉酶（Soil Amylase，S-AL）试剂盒说明书
点击次数：174发布时间：2022/3/7 12:00:30
更新日期：2024/10/16 15:41:56
所 在 地：中国大陆
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详细内容
土壤淀粉酶（Soil Amylase，S-AL）试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意 ：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物，是一种重要的酶制剂，广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
测定原理：
淀粉酶水解淀粉产生还原糖，可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质，在508nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。
需自备的仪器和用品：
天平、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1mL玻璃比色皿、甲苯。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体8mL×1瓶，4℃保存。若出现沉淀析出，需70℃加热溶解后再用。
试剂三：液体30mL×1瓶，4℃保存。
测定操作表：
|
| 对照管 | 测定管 |
| 土样（g） | 0.1 | 0.1 |
| 甲苯（μL） | 30 | 30 |
| 25℃静置15min | ||
| 试剂一（μL） | 550 | 250 |
| 试剂二（μL） |
| 300 |
| 充分混匀，37℃震荡1h，8000rpm，25℃，离心10min | ||
| 上清液（μL） | 500 | 500 |
| 试剂三（μL） | 500 | 500 |
| 充分混匀，90℃水浴5min，待冷却后，用蒸馏水调零，于1mL玻璃比色皿中测定508nm各管吸光值，分别记为A对照管和A测定管，△A=A测定管-A对照管。 | ||
计算公式：
标准曲线：y = 0.2525x - 0.034，R² = 0.9917
酶活单位定义：每g土样每天催化生成1mg还原糖为一个酶活力单位。
S-AL（mg/d/g 鲜重）=（△A +0.034）÷0.2525×V反总÷W÷T
=52.32×（△A +0.034）÷W
V反总：反应体系总体积，0.55mL；T：反应时间，1/24d； W：样本质量，g。
