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土壤亮氨酸氨基肽酶（Solid-Leucine Aminopeptidase,S- LAP）试剂盒
点击次数：180发布时间：2022/3/7 13:10:32
更新日期：2024/12/3 11:30:42
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
土壤亮氨酸氨基肽酶（Solid-Leucine Aminopeptidase,S- LAP）
试剂盒说明书
分光光度50管/24样
注 意 ：正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理：
S-LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体65mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；
S-LAP测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至405nm，蒸馏水调零。
2、 在试剂二瓶中加入30mL试剂一充分溶解（如较难溶解，可60℃水浴加热约30min促进溶解）；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3、 操作表
| 试剂名称 | 对照管 | 测定管 |
| 新鲜土样（g） | 0.2 | 0.2 |
| 试剂一（μL） | 1200 |
|
| 试剂二（μL） |
| 1200 |
混匀， 37℃振荡反应1h后，8000g 4℃离心10min，取1mL上清液于比色皿中，405nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-LAP活力单位的计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义：每天每g土样每天生成1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP（μmol/d /g 土样）＝ΔA×V反总÷（ε×d）×106÷W÷T=14.8×ΔA
V反总：反应体系总体积，1.2×10-3 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；T：反应时间，1h=1/24d； W：样本质量，0.2g。
