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土壤锰过氧化物酶（Soil manganese peroxidase，S-Mnp）试剂盒分光光度法
点击次数：185发布时间：2022/3/7 13:11:47
更新日期：2024/12/3 11:30:42
所 在 地：中国大陆
产品型号：
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详细内容
土壤锰过氧化物酶（Soil manganese peroxidase，S-Mnp）试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意 ：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
锰过氧化物酶（EC1.11.1.13）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，主要存在于担子菌中，属于木质素降解酶系，能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物，叠氮化合物、DTT，多环芳烃等。
测定原理：
锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下，将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚，在465nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪、甲苯。
试剂组成和配制：
试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体5mL×1瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样风干，过30-50目筛。
测定操作
|
| 对照管 | 测定管 |
| 土样（g） | 0.1 | 0.1 |
| 甲苯（μL） | 50 | 50 |
| 25℃，静置15min | ||
| 试剂一（μL） | 700 | 600 |
| 试剂二（μL） |
| 100 |
| 试剂三（μL） | 200 | 200 |
| 试剂四（μL） | 100 | 100 |
| 充分混匀，于30℃震荡反应3h，于10000rpm，4℃离心10min，取800μL于1mL玻璃比色皿，测定465nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管- A对照管 | ||
酶活计算公式：
酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
S-MnP活性（nmol/min/g 土样）= ×V反总÷W÷T= 8.3×△A÷W
ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，1mL；W：样本质量，g；T：反应时间，10min
