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土壤锰过氧化物酶(Soil manganese peroxidase,S-Mnp)试剂盒分光光度法
点击次数:185发布时间:2022/3/7 13:11:47
更新日期:2024/10/16 15:41:56
所 在 地:中国大陆
产品型号:
优质供应
详细内容
土壤锰过氧化物酶(Soil manganese peroxidase,S-Mnp)试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意 :正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
锰过氧化物酶(EC1.11.1.13)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。
测定原理:
锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在465nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪、甲苯。
试剂组成和配制:
试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体5mL×1瓶,4℃保存。
样品处理:
新鲜土样风干,过30-50目筛。
测定操作
| 对照管 | 测定管 |
土样(g) | 0.1 | 0.1 |
甲苯(μL) | 50 | 50 |
25℃,静置15min | ||
试剂一(μL) | 700 | 600 |
试剂二(μL) |
| 100 |
试剂三(μL) | 200 | 200 |
试剂四(μL) | 100 | 100 |
充分混匀,于30℃震荡反应3h,于10000rpm,4℃离心10min,取800μL于1mL玻璃比色皿,测定465nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,△A=A测定管- A对照管 |
酶活计算公式:
酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
S-MnP活性(nmol/min/g 土样)= ×V反总÷W÷T= 8.3×△A÷W
ε:愈创木酚摩尔消光系数:12100L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,1mL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min