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土壤纤维素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性测定试剂盒分光光度法
点击次数：185发布时间：2022/3/7 14:21:34
更新日期：2024/12/3 11:30:42
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
土壤纤维素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性测定试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意：正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
测定原理：
采用蒽酮比色法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯、硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存； 临用加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
加样表和测定步骤：
|
| 对照管 | 测定管 |
| 风干土样（g） | 0.1 | 0.1 |
| 试剂一 (μL) | 100 | 100 |
| 振荡混匀15min | ||
| 试剂二（μL ） |
| 180 |
| 试剂三（μL ） | 740 | 740 |
| 蒸馏水（μL ） | 360 | 180 |
37℃振荡反应3h后，90℃水浴15min（盖紧，防止水分散失）,冷却后
8000g 25℃离心10min，取上清，得糖化液
| 糖化液 (μL) | 350 | 350 |
| 试剂四 (μL) | 650 | 650 |
混匀， 90℃水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却，620nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-CL活力计算：
标准条件下测定的回归方程为y = 5.018x - 0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)
T：反应时间，3h=1/8d； V反总：反应体系总体积：1.2mL；W：样本质量，0.1g。
