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土壤总磷/有机磷/无机磷含量测定试剂盒分光光度法
点击次数:203发布时间:2022/3/7 15:41:05
更新日期:2024/10/16 15:41:56
所 在 地:中国大陆
产品型号:
优质供应
详细内容
土壤总磷/有机磷/无机磷含量测定试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
注 意:正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
土壤总磷包括有机磷和无机磷,其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷。同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷,可以全面反映土壤磷营养状况。
测定原理:
利用钼蓝法定磷。取一份土样,通过浸提法测定土壤无机磷含量;另外取一份土样,经高温灼烧后,土壤有机磷转化为无机磷,测得土壤总磷含量;总磷含量减去无机磷含量,即可计算出有机磷含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式水浴锅,分析天平、可调式移液器、550℃高温电炉,1mL玻璃比色皿、蒸馏水、100目筛子(可更小)。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。临用用蒸馏水稀释10倍后再用。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用配制,加入20 mL蒸馏水,充分溶解后加入10 mL试剂二,混匀。
标准品:液体×1支,20 μ mol/L无机磷标准品,4℃保存。
土壤不同形态磷提取:
1. 无机磷:称取通过100目筛子的风干土样0.1g,转移到10 mL离心管,加入10mL试剂一,震荡混匀,然后置于45℃水浴1h,8000g,25℃离心10min,取上清液一,用于无机磷含量测定。
2. 总磷提取:取通过100目筛子的风干土样,550℃灼烧1h,冷却后称取约0.1g,转移到10 mL离心管,加入10mL试剂一,震荡混匀,然后置于45℃水浴1h,8000g,25℃,离心10min,取上清液二,用于总磷含量测定。
测定步骤:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。
2. 打开水浴锅,调节温度到40℃。
3. 空白管:取EP管,依次加入500μL蒸馏水,500μL试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入50μL标准液,450μL蒸馏水,500μL试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入50μL上清液一或者上清液二,450μL蒸馏水,500μL试剂三,混匀后置于
40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
土壤磷含量计算:
1. 土壤无机磷含量(μmol /g)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V 总÷W =0.2×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
C标准液:20 μmol/L; W:土壤样品质量,g; V总:上清液一总体积,10 mL=0.01 L。
2.土壤总磷含量(μmol /g干重)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W=0.2×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
C标准液:20 μmol/L;V标准液:50μL=0.05 mL;W:土壤样品质量,g;V总:上清液二总体积,10 mL=0.01 L。
3. 土壤有机磷(μmol /g)=土壤总磷-土壤无机磷
注意事项:
试剂三配制过程中,可能会产生黑色固体,其不影响结果,注意吸取时不要将黑色固体吸入。