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铜蓝蛋白(Ceruloplasmin，Cp)测定试剂盒
点击次数：259发布时间：2022/3/8 16:10:56
更新日期：2024/10/16 15:41:56
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
铜蓝蛋白(Ceruloplasmin，Cp)测定试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白，有运输铜的功能，同时具有氧化酶的活性，是细胞外液重要的抗氧化剂。
测定原理：
铜蓝蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物，在645nm处有特征吸收峰，依此可得铜蓝蛋白活性。
自备实验用品及仪器：
天平、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。（使用37℃预热）
测定操作表：
1、 血清（浆）等液体样本：直接检测。
2、 动植物组织样本：称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水，进行冰浴匀浆。10000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
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| 空白管 | 测定管 |
| 样品（µL） | 100 | 100 |
| 试剂一（µL） | 300 | 300 |
| 试剂二（µL） | 200 |
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| 混匀，37℃预热5min | ||
| 试剂三（µL） | 400 | 400 |
| 混匀，37℃反应30min | ||
| 试剂二（µL） |
| 200 |
| 混匀，25℃放置5min，1 mL玻璃比色皿,空白管调零，测定OD645 | ||
计算公式：
1、 按体积计算
单位定义：37℃条件下，每分钟每毫升样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。
Cp活力（U/mL）=×V反总÷V样÷T=33.33×OD645
2、 按鲜重计算
单位定义：37℃条件下，每分钟每克样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。
Cp活力（U/g鲜重）=×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T=33.33×OD645÷W
3、 按蛋白浓度计算
单位定义：37℃条件下，每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。
Cp活力（U/mg prot）=×V反总÷（Cpr×V样）÷T=33.33×OD645÷Cpr
V样：0.1 mL；V反总：1 mL；T：反应时间，30min；V样总：加入提取液体积，1mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g
注意事项：
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性，请操作时做好防护措施。
