液氮罐验证

贮存液氮罐如何验证

液氮罐(Liquid)不管在世界各国，都早已被运用在很多的医药学行业里，在医疗界关键运用于超低温(Lowtemperature)储存干细胞(cell)，血液样版，冷藏(freezing)试管胚胎，及其人体冷冻(人体器官)等技术(technology)的实时控制都不可或缺它，那么贮存液氮罐又有什么特殊要求呢？

1：液氮罐主要用途是什么呢？

液氮罐主要是用来储存液氮，用于后期的低温实验或储存需要低温保存的样品如细胞、组织等（用于室内液氮的静置贮存，不宜在工作状态下作远距离运输使用）。

2：为什么液氮罐要做温度分布验证呢？

液氮罐主要是用来冷冻保存样品，但是液氮的易挥发性、箱体的密封性等会对液氮罐的液氮量有较大的影响，我们都知道液氮的温度是-196℃，但是在液氮罐中不止存在液氮，还存在液气混合相，再往上还有气相，这里面的温差巨大，那么如何保证液氮在消耗的过程中依然可以保证足够的低温呢，这就需要用液氮罐验证的数据来说话。 液氮验证的数据来源于空载和满载，在空载的状态下，液氮的消耗量较低，所以一般数据有24h就可以，但是在满载的状态下，液氮的消耗量是大于空载的，所以我们一般建议满载至少48h。

3：液氮罐温度监控探头和温度分布探头确认

对于气相罐而言，液氮罐设备监控探头至少应有一个位于装载区域靠近罐体部位置，若有多个监控探头的液氮罐，建议罐体部和底部至少放置一个探头。在实验中，温度的探头一般是分布在上下2层，那么，液氮随着消耗越来越少，上层的探头离液氮越远，温度也就越高，这就可能造成上层的温度超标，所以试验时间的长短对温度影响很大，同时我们也知道，液氮罐里的液氮是可以添加的，所以我们在验证过程中不添加液氮，48h的数据如果合格，那么在试验样品保存中只要及时添加液氮，就不会出现样品保存温度过高的情况，杜绝温度过高的影响。

4：液氮罐的气密性

影响液氮消耗的还有一个就是气密性，如果液氮罐的气密性比较好，能够有效的减少液氮的挥发，而且保证液氮罐内气相的稳定，不会出现温度急剧上升的情况。而这个在使用中可以通过罐口的“水雾”的多少来判断，罐口无“水雾”或者很少都能说明气密性不错。

*后一个我认为比较重要的是开盖时间，在开盖的状态下，液氮会大量挥发，所以在开盖取样的过程中液氮的挥发造成的影响也需要考虑，取样后的上层温度在稳定后是否合格，防止由于人员开盖操作时间过长导致的温度超标风险。

5：液氮罐在使用时，要经常记录液氮剩余量，也要及时补充液氮，那么什么时候补充液氮呢？如何测量液氮剩余量呢？

测量方法很简单，使用探条测量液氮的深度就可以知道什么时候该充氮了，塑料杆作探条放入罐中一段时间，取出放在空气中，探条上将出现一条箱线，这样就可测得液氮的高度。如不及时充氮，液氮将耗尽。

另外一种方法是：先确定液氮罐的临界重量(即该充氮时的重量)，然后每隔一段时间称一次，当与临界重量相同时，就该充氮了。

6：为了保证细胞储存环境达标，应定期对液氮罐进行确认，部分常见的液氮罐确认项目如下：

6.1对于能够自动充氮的液氮罐应定期检查电磁阀连接以及运行情况。

6.2液氮补充罐压力是否在接受范围内。

6.3 低液位报警功能测试。

6.4.高温报警功能确认，建议和低液位报警测试一起测试，可有效节约确认时间。

6.5 温度监控探头确认，对于气相罐而言，液氮罐设备监控探头至少应有一个位于装载区域靠近罐体部位置，若有多个监控探头的液氮罐，建议罐体部和底部至少放置一个探头。

    6.6 温度分布测试，使用校准过的温度监控探头在液氮罐内合理地均匀布置监测点，统计液氮罐实际储存条件下的温度是否在可接受范围内。

    6.7 开盖测试，模拟操作人员日常取细胞时对罐体的温度影响，这项测试有助于规范液氮罐日常取样操作流程，防止由于人员开盖操作时间过长导致的温度标风险。

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