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技术文章
台盼蓝染色液（0.4%）使用说明
点击次数：980 发布时间：2021/1/18 10:42:09
台盼蓝染色液（0.4%）
产品货号：T6102产品规格：50ml/100ml
产品简介：
台盼蓝(Trypan blue)又称锥蓝或锥虫蓝等，分子式为 C34H24N6Na4O14S4，分子量为 960.81，CAS Number 72-57-1，是种阴离子型染料。Trypan blue 不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，即产生所谓 的拒染现象 ,而死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色，是常 用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡，这与中性红作用相反。因此， 借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中常用的死细胞鉴定染 色方法之。
尚宝生物 Trypan blue stain(0.4%)常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色， 而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。台盼蓝染色后，通过显 微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量，0.4%为常用的浓度。
产品组成：
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 台盼蓝染色液（0.4%） | 50ml/100ml | 4℃ |
自备材料：
1. PBS
2. 细胞计数板
3. 显微镜
操作步骤（仅供参考）：
1. 收集细胞：
如果收集贴壁细胞，应用胰蛋白酶-EDTA 溶液消化细胞，收集细胞。如果收集悬浮细胞，则可以直接收集 细胞。收集好的细胞在 1000～2000g 离心 1min，弃上清，用 1ml PBS 重新悬浮细胞沉淀。
2. 台盼蓝染色：
吸取 100μl 细胞悬液到 1.5ml 或 0.5ml 离心管内，加入 100μl Trypan blue stain(0.4%) 轻轻混匀，静置染色 3min(染色时间可适当延长，但不宜超过 10min)。
3. 细胞计数：
吸取经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少需要数 500 个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。
细胞存活率计算公式如下： 细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数×100%
注意事项：
1. Trypan blue stain 对人体有轻微毒性，请注意小心防护。
2. 注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴次性手套操作。
有效期：12 个月有效。
原创作者：上海尚宝生物科技有限公司
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