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技术文章
改良Gomori三色染色液
点击次数:17 发布时间:2024/8/19 10:15:04
产品货号:R23259 产品规格:4×50ml/4×100ml 产品简介: 肌肉组织活检及相应的特殊染色,可以显示肌纤维的结构、类型及化学成分变化,帮助诊断各种类型的肌纤维疾病。肌肉组织活检技术不但可以对已发现的肌病有更明确深入的认识,还可以发现一些新的肌病,使骨骼肌肉病的诊断提高到形态和功能相结合的新水平。 骨骼肌组织活检宜采用低温急速冷冻切片的方法来进行染色观察。目的是为了真实的反应肌纤维各种形态和结构的变化,避免因固定、脱水、包埋和热处理等过程造成的人为假象和酶活性的丧失,并且使肌肉组织保存原有结构不被破坏。 Gomori三色染色是在Masson三色染色法基础上改良而来的结缔组织多色染色法,可使结缔组织中的多种成分着色,肌纤维呈青绿色,胶原纤维呈亮绿色,细胞核呈紫色,线粒体呈红色,背景为绿色,显色清晰,便于观察。 产品组成: 名称 4×50ml 4×100ml 保存条件 试剂(A) :Weigert 铁苏木素染色液 A1: Weigert染液A 25ml 50ml 室温,避光 A2: Weigert染液B 25ml 50ml 室温,避光 临用,取A1、A2 等量混合即为 Weigert 铁苏木素染色液,不宜提配制。 试剂(B): 酸性乙醇分化液 50ml 100ml 室温 试剂(C): Gomori染色液 50ml 100ml 4℃,避光 试剂(D): Gomori分化液 50ml 100ml 室温 自备材料: 1. 系列乙醇 2. 蒸馏水 操作步骤:(仅供参考) 1. 新鲜肌肉组织取材后立即进行冰冻切片。切片厚度为10-15um。 2. 用配制好的Weigert铁苏木素染色5~10 min。 3. 流水冲洗5-10 min,镜下观察。如果染色过深,可用 酸性乙醇分化液分化数。 4. 水洗返蓝,蒸馏水洗2~4次。 5. 入Gomori染色液染色20~40min。流水冲洗。 6. 在上述操作过程中按 蒸馏水: Gomori分化液 =4:1比例配制Gomori分化工作液 。 7. 用Gomori分化工作液洗30s-90s,以镜下观察适当为宜。流水冲洗。 8. 95 %乙醇快速脱水,无水乙醇脱水3次,每次5~10s。 9. 二甲苯透明3次,每次1~2 min,中性树胶封固。 染色结果: 胶原纤维 亮绿色 肌纤维 青绿色 异常病变的肌纤维(包涵体物质) 红色 线粒体 红色 细胞核 紫色 背景 绿色 注意事项: 1. Weigert铁苏木素染液即配即用 ,一般24h失去染色力。 2. 组织要绝对新鲜。取材后立即进行低温急冻,否则会形成冰晶,致使组织结构离散。 3. 采用Weigert染细胞核,因为染色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维,一般也可以省略该染色步骤。 4. 酸性乙醇 的分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。 5. Gomori染色液应于冰箱内保存,超过有效期应丢弃染色鲜亮。 6. Gomori分化工作液分化的时间应根据染色液的效期长短做适当调整,一般新配置染色液,分化时间越长,染色液配置时间越长,分化时间越短。同时应根据实际染色情况做适当调整。 有效期:12个月有效。
原创作者:上海尚宝生物科技有限公司