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公司新闻
尚宝生物杆粒提取试剂盒买送!!!
点击次数:529发布时间:2021/1/19
产品货号:P0123
产品规格:100 次/200 次
杆粒提取试剂盒(核酸提取纯化相关)产品简介:
适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。
包装清单:
产品名称 | 100 次 | 200 次 | 储存条件 |
Solution 1 | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
Solution2 | 30ml | 60ml | 室温 |
KAC | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
End Solution | 4ml | 8ml | 2-8℃ |
自备试剂:50 次自备 36ml 无水乙醇/100 次自备 72ml 无水乙醇/100 次自备 144ml 无水乙醇
操作步骤:
1. 将估计 DNA 反应液的体积,加入 5 倍体积的 Buffer PG,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。 注意:如 DNA 反应体系为 50µl(不包括石蜡油体积),则加入 250 µl Buffer PG。
2. 柱平衡:向已装入收集管(Collection Tubes)中的吸附柱(Spin Columns)中加入 200μl Buffer
3. PS,12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
4. 将步骤 3 或 4 所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置 2 分钟,12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收 集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
5. 向吸附柱中加入 450 μl Buffer PW(使用请先检查是否已加入无水乙醇),12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收 集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如果纯化的 DNA 用于盐敏感的实验(例如平末端连接或直接测序),建议加入 Buffer PW 静置 2-5 分钟再离心。
6. 重复步骤 4。
7. 12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收集管中的废液。
注意:这步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。 将吸附柱放到个新的 1.5 ml 离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加 50μlBuffer EB,室温放置 2 分钟。 12000 rpm 离心 1 分钟,收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA。
注意事项:
1. 次使用应按照试剂瓶标签的说明在 Buffer PW 中加入无水乙醇。
2. 所有离心步骤均可室温下进行。