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点击次数：387 发布时间：2020/12/31 9:55:59

、材料

1. 动物：大鼠或者小鼠

2. 试剂：胶原酶（厂家：ThermoFisher）、生理盐水

3. 仪器设备和耗材，如下：

序号	货号	型号	名称	规格	单位	数量
1	10-0030	Nova1000	小动物麻醉机	移动型、异氟烷罐、POUR FILL、CAGE MOUNT。体化集成功能配置：移动支架、内置气源泵、抽气泵、废气吸收罐、大小鼠预麻箱、抽屉箱、置物篮及管路	台	1
2	10-2203		小鼠定位仪用面罩-G2		个	1
3	10-2204		大鼠定位仪用面罩-G2		个	1
4	30-1040	SR200D	脑立体定位仪	大鼠、双臂、数显	套	1
5	20-0100	Elite100	脑立体用微量注射泵	0.5ul-100ul,注射回抽，触屏	套	1
6	19-7010	FASTRONG	颅钻	0-35000RPM顺逆转，脚踏和手控，带钻头	套	1
7	16-0050	FOI304	LED冷光源	色温6000K，35W光强可调	套	1
8	16-0003	SM200B	体视显微镜	摇臂式双目	套	1
9	21-2000		HAMILTON注射器	5ul/700N/pst2尖头/26sG/51MM	支	1
10	18-8010		大脑手术器械包	13件套	套	1
11	18-8090		动物手术消毒套装	7件套	套	1
12	19-7001		小动物剃毛器		套	1
13	19-7223		红霉素眼膏	0.5%*2G（5支/包）	包	1
14	10-3022		气体吸收罐	#S，6个/箱	箱	1
15	10-3026		活性炭	6袋/箱	箱	1
16	24-0058		平衡木	1.25M	套	1
17	26-0080	HG620	爪抓力测试仪		套	1
18	26-0010	HR420M	转棒仪(6只小鼠)		套	1
19	26-0020	HR420R	转棒仪(4只大鼠)		套	1

二、方法（以大鼠为实验对象）

1. 准备成年wistar大鼠，体重250－300g，禁食12h，禁水6h；

2. 使用气体麻醉机，将动物放入预麻箱，异氟烷快速深度麻醉；

3. 取出动物，将动物头部固定于立体定位仪上（安装有定位仪用麻醉面罩），接通气体麻醉机，使动物维持麻醉，即可开始手术；

4. 老鼠眼部涂红霉素眼膏，以防干裂；

5. 老鼠头部备皮，酒精和碘伏棉球消毒后，头皮正中切口，剥离骨膜，确定囟参考零点坐标，然后移动定位仪X和Y轴操作臂（右臂），定位到囟后1mm，中线偏左3mm处，颅钻钻直径0.6mm的小孔；

6. 进步用固定在立体定位仪左臂的微量注射泵（装有注射器和药物）沿小孔中心位置，垂直缓慢进针，进针深度6mm（左侧尾状核的位置），设置注射参数，缓慢注入胶原酶VII0.5U（用生理盐水配成1U/uL），注药后留针10分钟；

7. 注射完毕，缝合皮肤，回笼饲养，给予正常进食进水，室温控制在25度左右。

8. 术后观察神经症状体征。

三、模型评判

1. BBB观察评分：据Berderson等的评分标准分为三。I：将大鼠尾巴提起来，瘫痪侧肢回收后屈曲于腹下，正常侧肢向地面伸展；II：除以上体征外，向瘫痪侧推大鼠时阻力较对侧明显降低；III：除以上症状外，大鼠有向患侧侧旋的行为。出现以上症状为造模成功；

2. 仪器测评：平衡木、爪抓力和转棒，与动物协调性、力量性指标相关仪器进行测量。

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