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技术文章

植物总酚含量检测试剂盒

点击次数:25 发布时间:2022/9/5 11:02:07

 植物总酚含量检测试剂盒

产品货号:BA1798

 

产品规格:120T

 

产品简介:

酚类物质是植物体中重要的次生物质,对植物生长发育有一定的调节作用,能够清除自由基起到抗氧化的作用,并具有较高的营养价值和医疗保健作用,同时在植物抗病、基因的诱导表达和生物固氮等方面也具有重要作用,在化妆品、食品和医药等域具有广泛应用。酚类物质在碱性条件下能够将钨钼酸还原生成蓝色化合物,产物在760nm处具有特征吸收峰,通过吸光值的变化即可定量检测植物中总酚的含量。

 

产品组成:

名称

规格

保存条件

使用说明及注意事项

提取液

液体120mLx1

4℃

-

试剂一

液体5mLx1

4℃ 避光

具有刺激性操作时请做好防护措施

试剂二

液体8mLx1

4℃

-

标准品

粉剂x1

(5mg没食子酸标准品)

4℃ 避光

使用加入1mL蒸馏水充分溶解

(50加热促溶,即为5mg/mL没食子酸标准液)

标准稀释液的制备:将5mg/mL没食子酸标准液使用蒸馏水稀释至0.30.20.10.050.0250.0125mg/mL即为标准稀释液。

 

序号

A

1

2

3

4

5

6

稀释浓度(mg/mL)

5.0

1.0

1.0

1.0

0.1

0.05

0.025

标准液体积(μL)

100

150

100

50

200

200

200

蒸馏水体积(μL)

400

350

400

450

200

200

200

稀释后浓度(mg/mL)

1.0

0.3

0.2

0.1

0.05

0.025

0.0125

 

操作步骤(仅供参考) 

1. 植物总酚的提取(可根据预实验结果适当调整样本量及比例)植物样本烘干至恒重,粉碎后过30-50目筛;称取约100mg粉碎样本,加入2mL提取液,超声提取(60℃,功率300W,超声5s,间歇8s,总时间30min),12000rpm常温离心10 min,取上清即为待测样本。

2. 测定步骤分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至760nm,蒸馏水调零。

96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂:

试剂

测定组(μL)

对照组(μL)

标准组(μL)

空白组(μL)

待测样本

10

10

-

-

标准稀释液

-

-

10

-

蒸馏水

-

-

-

10

试剂一

50

-

50

50

充分混匀,25℃静置2min

试剂二

50

50

50

50

蒸馏水

90

140

90

90

充分混匀,25℃静置10min

 

吸光值测定:测定760nm处吸光值,记为A测定、A对照、A标准和A空白;计算∆A测定=A测定-A对照,∆A标准=A标准-A空白。注:每个测定组均需设一个对照组,空白组只需测定1-2次。

标准曲线的建立:以0.30.20.10.050.0250.0125mg/mL为横坐标(x),以其对应的∆A标准为纵坐标(y),绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将∆A测定带入公式中得到xmg/mL)。

3. 植物总酚含量计算

按植物样本蛋白浓度计算

总酚含量(mg/mg prot)= x×V提取/(Cpr×V提取)=x/Cpr

按植物样本质量计算

总酚含量(mg/g)=x×V提取/W=2×x/W

注释:V提:提取液总体积,2mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样品质量,g

 

注意事项: 

1. 若测定吸光值超出标准吸光值线性范围,建议适当增加样本量或将待测样本适当稀释后再进行测定,计算时相应修改。 

2. 为结果准确且避免试剂损失,测定请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定。

 

 

 

原创作者:上海尚宝生物科技有限公司

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