产品货号：BA1506

产品规格：100管/48样

产品简介：

植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化 妆品、食品、医药等域。

在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在760nm处有特征吸收峰，测760nm处的吸光值， 即可得样本总酚含量。

技术指标： 

检出限：0.0015 mg/mL

线性范围：0.0024-0.3125mg/mL

注意：实验之建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

产品内容：

溶液的配制：

1. 提取液：自备60%乙醇，常温保存。

2. 标准品：5mg没食子酸。临用加入1mL蒸馏水，50℃加热溶解，配制成5mg/mL的标准溶液。

需自备的仪器和用品：

天平、烘箱、粉碎仪、30-50目筛、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

将样本烘干至恒重，粉碎，过30-50目筛之后，称取约0.1g，加入2.5mL提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，破碎5s，间歇8s，60℃，提取30min。12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待测。

二、测定操作表： 

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至760nm，蒸馏水调零。

2. 标准液的制备：将5mg/mL没食子酸标准溶液用蒸馏水稀释至0.1562、0.0781、0.0391、0.0195、0.0098、0.0049 mg/mL，待测。

3. 操作表

三、总酚含量计算：

1. 标准曲线绘制：以不同浓度的没食子酸为x轴，ΔA（A标准-A空白）为y轴绘制标准曲线y=kx+b。

2. 植物总酚含量计算：将ΔA=A测定-A对照带入标准曲线，求x(mg/mL)。

（1）按样本质量计算

总酚含量（mg/g 质量）=x×V提取÷W=2.5x÷W

（2）按样本蛋白浓度计算

总酚含量（mg/mg prot）=x×V提取÷（V提取×Cpr）=x÷Cpr

V提取：提取液体积，2.5mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。

注意事项： 

1. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

2. 试剂一对皮肤有一定的刺激性，请操作时做好防护措施。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司