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技术文章

种子生活力检测试剂盒(溴麝香草酚蓝BTB法)

点击次数:20 发布时间:2022/9/19 14:02:47

种子生活力检测试剂盒(溴麝香草酚蓝BTB法)

产品货号:BA1796

 

产品规格:100ml/500ml

 

产品简介:

种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力,其高低决定了种子品质和实用价值大小,关系到播种时的用种量,测定种子生活力常用方法为发芽实验法,即在适宜条件下让种子吸水萌发,在规定天数内统计发芽的种子占供试种子数的百分比。但是常规发芽实验法需时较长,无法用于应急需要,也无法检测休眠种子的生活力。常用比较快速的检测方法有氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚蓝(BTB)法、红墨水染色法和荧光法等。

具有生活力的种胚有呼吸作用,吸收空气中氧气放出二氧化碳,二氧化碳溶于水生成碳酸,又解离出氢离子和碳酸氢根,使得种胚周围环境的酸度增加,因此可以用溴麝香草酚蓝(BTB)来定性测定酸度的改变。BTB的变色范围为pH6.0~7.6,在酸性介质中呈黄色,在碱性介质中呈蓝色,中间色为绿色(变色点为7.1),因此可根据BTB 颜色差异来判断种子的生活力。本方法有以下优点:快速、准确;颜色变化明显,易于观察。

 

产品组成:

产品名称

100ml

500ml

保存条件

试剂(A): BTB指示剂

100ml

500ml

室温,避光

试剂(B): 琼脂粉

1.5g

7.5g

室温

 

自备材料:

1. 材料:小麦、绿豆、水稻、油菜、花生、玉米等植物种子

2. 恒温箱

3. 培养箱

4. 培养皿

 

操作步骤:(仅供参考)

1. 浸种:将待测种子用30℃温水浸泡2~6h,使种子充分吸胀。

2. 配制BTB琼脂凝胶:取适量的BTB指示剂和琼脂粉,按BTB指示剂:琼脂粉=10ml0.15g的比例混合,用恒温箱或微波炉加热助溶,待琼脂粉溶解后,趁热倒在干净的培养皿即为BTB琼脂凝胶,厚度以能浸没种子为宜,冷却后备用。

3. 随机取100粒吸胀种子,种胚朝下,整齐地埋于BTB琼脂凝胶中,间距至少1cm

4. 将培养皿置于30~35℃恒温箱中培养1~4h

5. 在蓝色背景下观察,种胚附件呈现较深黄色晕圈的是活种子,否则是死种子。

6. 可以用在沸水中浸泡处理的种子进行多种观察。

 

染色结果:

活种子       种胚附近呈深黄色

死种子       种胚附近无颜色变化

 

计算:

观察统计100粒种子,计算有活力种子的百分数。其公式为:

种子生活力百分数(%)=活种子粒数/100×100 %

 

注意事项:

1. BTB凝胶厚度取决于种子的大小,原则上需种胚接触培养皿底部后尚有部分露出凝胶上方,凝胶厚度应使种子稳定其中。

2. 种子需完好无损,不能有破种子或霉变种子。

3. BTB指示剂应为蓝色溶液,如变黄色或绿色,说明 pH 降低,可滴加稀氨水或者氢氧化钠等碱性试剂调整为蓝色即可正常使用。

4. 培养温度一般以30~35℃为宜。

 

有效期 12个月有效。

 

原创作者:上海尚宝生物科技有限公司

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