产品货号：BA1753

产品规格：50T/100T

产品简介：

叶绿体是光合作用的细胞器，在光合作用研究中，常需要用提取的叶绿体展开下游研究工作。叶绿体中所含的色素主要有两大类，叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)，它们与类囊体膜上的蛋白质结合，成为色素蛋白复合体，其中叶绿素又称叶绿体色素(Chlorophyll)。

叶绿素(Chlorophyll)检测试剂盒(微板法)检测原理是叶绿素不溶解于水，而溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提叶绿素，根据朗伯-比尔定律，某有色溶液的吸光度(A)与其中溶质浓度(C)和液层厚度(L)成正比，即A=αCL，其中α为比例常数，当溶液浓度以百分比浓度为单位，层液厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。在本试剂盒情况下，叶绿素a和叶绿素b在有好的吸收波，根据经验公式可计算出叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量。该试剂盒主要用于植物组织中叶绿素的提取以及定量检测叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量。该试剂仅用于科研域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1. 研钵或匀浆器

2. 离心管

3. 滤纸或纱布

4. 96孔板

5. 酶标仪

操作步骤：

1. 叶绿素提取：

①取菠菜或其他植物新鲜叶片，洗净，擦干，去中脉，称取剪碎的新鲜样品0.1g，置于研钵或匀浆器，加入少量提取粉剂(约50mg)和1mlChlorophyllAssaybuffer，研磨或匀浆成液态。

②将研磨液或匀浆液转移离心管，用少量叶绿素提取液冲洗研钵或匀浆器数次，后连残渣一同倒入离心管，补加Chlorophyll Assay buffer，混匀，避光放置。

③观察底部组织残渣接近于白色，即为提取完，如果仍有较多组织颜色，应再加入Chlorophyll Assay buffer继续避光放置。

④滤纸或三层纱布过滤，留取滤液，即为叶绿素粗提液。

2. 测定：取叶绿素粗提液加入96孔板的孔中，以酶标仪，以Chlorophyll Assay buffer调零，测定粗提液在处吸光度(A₆₆₅、A₆₄₉)。

计算：

叶绿素a含量(mg/g)=C_a×S×V×N/(W×1000)

叶绿素b含量(mg/g)=C_b×S×V×N/(W×1000)

总叶绿素含量(mg/g)=C_T×S×V×N/(W×1000)

式中：C_a=13.95×A₆₆₅-6.88×A₆₄₉

C_b=24.95×A₆₄₉-7.32×A₆₆₅

C_T=6.63×A₆₆₅-18.07×A₆₄₉

S=检测溶液的试剂高度(ml)，可通过测量或计算获得。

V=叶绿素粗提液体积(ml)=10(ml)

N=稀释倍数

W=样品鲜重或干重(g)

注意事项：

1. 为了避免叶绿素见光分解，操作时应尽量避光，研磨或匀浆时应尽量缩短时间。

2. 测定吸光度值大于1时，可适当稀释后再进行测定。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性口罩。

保存条件：12个月有效。

原创作者：内蒙古邦美管道疏通有限公司