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技术文章
肝素钠检测试剂盒(天青A比色法)
点击次数:27 发布时间:2022/12/5 10:25:26
产品货号:BA1818
产品规格:100T
产品简介:
肝素钠是一种黏多糖,在多糖链上带有很多阴离子基团如磺酸基、羧基等,因此肝素具有强负电性,能与阳离子或带正电荷的分子结合,形成复合物。天青A是一种碱性燃料其正电荷与肝素的阴离子结合,生成肝素-天青A复合物。即产生一种颜色反应,该反应程度与肝素的结合量具有一定比例关系,在505nm处检测吸光度,在碱性条件下,肝素浓度与吸光度值符合郎伯-比耳定律,通过检查标准曲线,获得肝素(钠)的效价。本试剂盒仅用于科研域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
名称 | 100T | 保存条件 |
试剂(A): 肝素标准(100U/ml) | 2ml | -20℃,避光 |
试剂(B): Heparin检测液 | 50ml | 2-8℃,避光 |
试剂(C): 天青显色液 | 50ml | 室温,避光 |
操作步骤(仅供参考):
1. 稀释标准品。
2. 制作标准曲线:取干净离心管或试管,按下表进行操作,以0号管为空白对照,加入显色液后均应混匀,检测505nm处吸光度。可重复检测3次,测定结果求平均值,以效价为横坐标,吸光度为纵坐标作图得标准曲线。
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
肝素标准(1U/ml) | 0 | 0.4 | 0.8 | 1.2 | 1.6 | 2.0 |
蒸馏水/ml | 2.0 | 1.6 | 1.2 | 0.8 | 0.4 | 0 |
Heparin检测液/ml | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
天青显色液/ml | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
3. 肝素钠测定:准确称取一定量的待测肝素钠样品,用蒸馏水溶解成1mg/ml的溶液。检测之,准确稀释成待测液。按下表进行操作,以蒸馏水为空白对照,加入显色液后均应混匀,检测505nm处吸光度。
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
肝素标准/ml | - | X | - |
蒸馏水/ml | 2.0 | 2.0-X | - |
Heparin检测液/ml | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
天青显色液/ml | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
计算公式:肝素钠样品的效价(U/ml)=(P×V)/(m×Vi)
注意事项:
1. 上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2. 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
3. 如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
原创作者:上海尚宝生物科技有限公司