产品货号：BA1718

产品规格：100T

产品简介：

维生素C(Vitamin C)又称L-抗坏血酸，是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。在生物体内维生素C是一种抗氧化剂，为酸性己糖衍生物，是稀醇式己糖酸内酯，保护身体免于自由基的威胁，同时也是一种辅酶，其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc有L-型和D-型两种异构体，只有L-型的才具有生理功能，还原型和氧化型都有生理活性。

维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)检测原理是在强酸和偏磷酸根离子存在条件下，钼酸铵能与维生素C反应生成蓝色化合物，在一定浓度范围(样品浓度控制在25~250μg/ml)，吸光度值与浓度呈线性关系，以酶标仪760nm处检测吸光度，获得Vitamin C含量。该试剂盒主要用于植物组织中的维生素C(抗坏血酸)的检测，其优点是：1、反应迅速；2、操作简便；3、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰，因此一性好。本试剂盒仅用于科研域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

 需自备的仪器和用品：

蒸馏水、电子天平、研磨器或匀浆器、离心管或试管、离心机、水浴锅或恒温箱、酶标仪、96孔板。

操作步骤（仅供参考）：

1. 配制组织匀浆液：按组织匀浆液A:组织匀浆液B:蒸馏水=8:1:91的比例混匀即得。

2. 准备样品：取待测材料如青菜、水果、松针等，清洗擦干，准确称量1g，加入研磨器内，再加入少量组织匀浆液，研磨碎，留取上清，再次用组织匀浆液研磨，后一并倒入10ml离心管，补充组织匀浆液至10ml，充分混匀，4000g离心5min，取0.05ml上清液，加入等量蒸馏水，即为待测液。

3. 配制MPA工作液：取一支0.3g MPA粉末，充分溶解于10ml酸性缓冲液Ι中，也可根据使用情况称取一定量的MPA按比例溶解即可，4℃保存3~4天有效。

4. 配制Vitamin C Assay buffer：取钼酸铵粉末0.5g，充分溶解于10ml蒸馏水中，也可根据使用情况称取一定量的钼酸铵加水按比例溶解即可，4℃避光保存。注意：钼酸铵溶于水会逐渐变化乳白色浊液，则不能使用。

5. 配制系列Vitamin C标准：取干净离心管或试管，按下表进行操作，依次稀释。

6. Vitamin C加样：按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的Vitamin C含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测设置2平行孔，求平均值。

7. Vitamin C测定：立即混匀，30℃水浴20min，空白调零，以酶标仪测定760nm处系列标准孔、测定孔的吸光度。

计算：以系列标准Vitamin C浓度(50、75、100、125、150、200、250μg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程，以测定孔的吸光度代入回归方程求得维生素C含量。

100g样品中维生素C含量(mg)

=(c₀×V₁)×100/(m₁×1000)=(c₀×V₁) /(m₁×10)

式中：c₀:待测样品的吸光度值在标准曲线上查出的维生素C的浓度(μg/ml)

V₁:待测液的总体积(ml)

m₁:样品质量(g)

1000:μg换算成mg

注意事项：

1. Vitamin C标准避免反复冻融，以免失效或效率下降。

2. 组织匀浆液A保存温度过低时易产生结晶，可用温水浴溶解后再使用。

3. Vitamin C Assay buffer室温保存时间过长或者过期会出现白色粘稠物，不可使用，应换新的产品使用。不使用时建议4℃保存。

4. 待测样品如不能及时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。

5. 如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

有效期：6个月有效。4℃运输，4℃保存。 

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司