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技术文章
Bradford蛋白浓度测定试剂盒
点击次数:13 发布时间:2023/11/2 10:37:26
产品货号:16005
产品规格:500次/1000次
产品简介:
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是根据常用的两种蛋白浓度检测方法Bradford法研制而成,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。检测速度快,10-20个样品只需不足10分钟即可完成。灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。
包装清单:
产品名称 | 500次包装 | 1000次包装 | 储存条件 |
Bradford溶液 | 100ml | 200ml | 2-8℃ |
蛋白标准BSA (5mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
操作步骤:
1. 蛋白标准品的准备
融化蛋白标准品,取10μl稀释至100μl,使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 蛋白浓度测定
a. 将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20μl, 相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
b. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20μl,需加标准品稀释液补足到20μl。请注意记录样品体积。
c. 各孔加入200μl Bradford溶液,室温放置3-5分钟。
d. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。
注意事项:
1. Bradford溶液使用请颠倒3-5次,混匀。
2. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3. 将Bradford溶液恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。
4. 需可检测560-610nm之间波长的酶标仪一台,检测波长为595nm。并需96孔板。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
Bradford溶液4℃保存,蛋白标准-20℃保存,本试剂盒自订购之日起12个月内有效。
原创作者:上海尚宝生物科技有限公司