产品货号：R23245

产品规格：5×50ml

产品简介：

三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase，ATPase)是一种水解酶，是催化ATP合成的一种酶。三磷酸腺苷酶根据所用激活剂、抑制剂以及酶定位的不同分为膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、线粒体三磷酸腺苷酶等。ATPase能水解三磷酸腺苷为磷酸腺苷和磷酸，此酶只作用于磷酸与磷酸之间的高能键，因而释放大量能量。其催化反应如下：

A-P-P-P + H2O→A-P-P + H3PO4 +能量

尚宝生物 ATPase染色(钙钴法)原理在于三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷为二磷腺苷和磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，终产物为黑色硫化钴沉淀。该试剂仅用于科研研究，不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1. 蒸馏水、中性福尔马林固定液

2. 恒温箱

操作步骤(仅供参考)：

1. 冰冻切片直接入蒸馏水。

2. 入钙盐溶液中，37℃温箱5min。

3. 入ATPase孵育液，孵育40min。蒸馏水洗1min。

4. 入硝酸钴溶液5min，入蒸馏水。

5. 入中性福尔马林固定液室温固定2min。流水冲洗2min。

6. 在上述过程中配制ATPase硫化工作液，即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍, 即为ATPase硫化工作液，即配即用。

7. 切片入ATPase硫化工作液，孵育2min。

8. 流水洗10min后，入蒸馏水。甘油明胶封固。

染色结果：

酶所在阳性部位      黑色或棕黑色

阴性对照 (可选) ：

1. 取对照切片，用试剂ATPase对照液进行孵育，并与用ATPase孵育液孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在，两者不同部位才是ATP酶活性所在。

2. 将切片入80℃蒸馏水10min，再不其他组织切片同时孵育，结果应为阴性。

注意事项：

1. ATPase孵育液、ATPase硫化液易失效，分成小分储存，一经开启立即使用。

2. ATPase硫化溶液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。

3. 冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。

4. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司