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技术文章
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(500次)
点击次数:50 发布时间:2024/11/25 10:52:43
产品货号:20311 产品规格:500次 产品简介: MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物Formazan。在特定溶剂存在的情况下,可以被溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。 本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方,无需去除原有的培养液,可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。从而避免了由于去除培养液时Formazan被部分去除而引起的误差。 本试剂盒本底低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便。 本试剂盒可以测定500个样品。 包装清单: 产品名称 包装 储存条件 MTT溶液 10ml 4℃/保存-20℃、避光 Formazan溶解液 55ml 4℃、避光 操作步骤: 1. 通常细胞增殖实验每孔加入100μl 2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100μl 5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。按照实验需要,进行培养并给予0-10μl特定的药物刺激。 2. 每孔加入20μl MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育4小时。 3. 每孔加入100μl Formanzan溶解液,在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会长一些,建议室温或37℃过夜孵育。 4. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片,可以使用560-600nm的滤光片。 注意事项 : 1. 由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于96孔板周围一圈容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS、水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。 2. MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。 3. Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。混匀过程请用移液枪轻轻吹匀,勿上下颠倒,避免气泡。 4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 产品货号:20311 产品规格:500次 产品简介: MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物Formazan。在特定溶剂存在的情况下,可以被完。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。 本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方,无需去除原有的培养液,可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。从而避免了由于去除培养液时Formazan被部分去除而引起的误差。 本试剂盒本底低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便。 本试剂盒可以测定500个样品。 包装清单: 产品名称 包装 储存条件 MTT溶液 10ml 4℃/保存-20℃、避光 Formazan溶解液 55ml 4℃、避光 操作步骤: 1. 通常细胞增殖实验每孔加入100μl 2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100μl 5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。按照实验需要,进行培养并给予0-10μl特定的药物刺激。 2. 每孔加入20μl MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育4小时。 3. 每孔加入100μl Formanzan溶解液,在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会长一些,建议室温或37℃过夜孵育。 4. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片,可以使用560-600nm的滤光片。 注意事项 : 1. 由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于96孔板周围一圈容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS、水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。 2. MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。 3. Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。混匀过程请用移液枪轻轻吹匀,勿上下颠倒,避免气泡。 4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
原创作者:上海尚宝生物科技有限公司