组织无机磷含量检测试剂盒（可见分光光度法）

正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

产品货号：BA1481

产品规格：50管/48样

产品内容：

试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用配制，加入20 mL蒸馏水，充分溶解后加入试剂二(全部)，混匀。

标准品：液体1mL×1支，1mmol/L无机磷标准液，4℃保存。

产品说明：

无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。

钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收，即可计算无机磷含量。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

操作步骤：

一、无机磷提取： 

称取约0.1g组织，加试剂一1.0 mL冰上充分匀浆，4℃，10000rpm，离心10min，取上清液，置冰上待测。

二、测定：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。

2. 打开水浴锅，调节温度到40℃。

2. 测定：

分别混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，分别记为A空白管、A标准管、A测定管。

注意：需在40min内完成比色，空白管和标准管只需测定一次。

三、组织无机磷含量计算： 

无机磷含量(mmol/g 样本鲜重)= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷W

=0.001×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷W

C标准液：1mmol/L；V总：上清液总体积，1mL=0.001 L；W：样品质量，g。

注意事项：

1、试剂三需临用配制，限当天使用。

2、测定先用1~2个样品做预实验，如吸光值大于0.8，需用蒸馏水做相应稀释。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司