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技术文章
种子生活力检测试剂盒(TTC法)
点击次数:34 发布时间:2022/6/24 11:09:11
目录编号:R23152
产品规格:100ml
产品简介:
种子生活力(简称种子活力)是指种子能够萌发得潜在能力或种胚具有的生命力。种子生活力得高低决定了种子品质和实用价值大小,关系到播种时的用种量,测定种子活力常用发芽实验法,即在适宜条件下让种子吸水萌发,在规定天数内统计发芽的种子占供试种子数的百分比。
TTC是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中形成无色溶液,还原后生成红色不溶于水的三本甲腙,该物质比较稳定,不易被氧化,所以TTC被广泛用于酶实验的氢受体,TTC还原量能表示脱氢酶活性,进而判断小麦、绿豆、水稻、油菜、花生等植物种子活力。当TTC染色液渗入种胚的细胞内,被染成红色;当种胚活力下降时,呼吸作用明显减弱,脱氢酶的活性下降,胚的颜色变化不明显;当种胚无活力时,不着色,故可以由染色的程度推知种子的生命力强弱。
产品组成:
产品组成 | 规格 | 保存温度 |
试剂(A): TTC | 1支 | 室温 |
试剂(B): TTC stain buffer | 100ml | 室温,避光 |
自备材料:
1. 材料:小麦、绿豆、水稻、油菜、花生等植物种子
2. 恒温箱
3. 培养皿
4. 单面刀片
操作步骤:(仅供参考)
1. 配制TTC染色液:取1支TTC溶解于TTC stain buffer,即为TTC染色液。4℃避光保存,2个月有效。对于花生、甜菜、大麻、向日葵、水稻、高粱、玉米及麦类作物等,可用蒸馏水稀释TTC染色液5倍,即为0.2×TT C染色液后使用。不同样本染色差异见附表。
2. 将待测种子用30℃温水浸泡2-6h,使种子充分吸胀。
3. 随机取100粒吸胀种子,沿种胚中央准确切开,每粒种子的一半备用。
4. 将切好的种子放在培养皿中,加入适量TTC染色液,以浸没种子为度。
5. 放入30-35℃的恒温箱内保温30 min,也可在20℃的室温下放置40-60 min。
6. 保温后顷出染液,用自来水冲洗2-3次,立即观察种胚着色情况,判断种子有无生活力。
染色结果:
活力强 胚发育良好、完整、整个胚染成红色;叶子有小部分坏死,其部位不是胚中轴和子叶连接处;胚根尖虽有小部分坏死,但其他部位完好。
活力弱 淡红色
无活力或不育 胚全部或大部分无色;胚根不染色部分不限于根尖;子叶不染色或丧失机能的组织超过
1/2;胚染成很淡的紫红色或淡灰红色;子叶与胚中轴的连接处或在胚根上有坏死的部分;胚根受伤以及发育不良的未成熟的种子。
计算:
观察统计100粒种子,计算有活力种子的百分数。其公式为:
种子活力百分数( %) =有活力花粉数/100×100 %
注意事项 :
1. 染完色后应立即观察,放久会褪色。
2. TTC 染色液开盖后尽快使用,否则效率会下降,如果变成红色应弃用。
3. 染色温度一般以25-35℃为宜。
有效期:12个月有效。
原创作者:上海尚宝生物科技有限公司