枸橼酸盐缓冲液（0.01M，pH=6.0）
产品货号：T16731 产品规格：500ml 产品简介： 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时，需要行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高检测的准确性。枸橼酸盐缓冲液（0.01M，pH=6.0）是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时，考虑进行抗原修复。 按照每个片子需要10ml抗原修复液计算，500ml抗原修复液可以用于50个样本的抗原修复。产品组成 名称 规格 保存条件枸橼酸盐缓冲液（0.01M，pH=6.0） 500ml 2-8℃使用方法： 1. 对于石蜡切片： a. 脱蜡：二甲苯3次，每次3-5min→ 无水乙醇2次，每次3-5min→ 95％乙醇1次，3-5min→90%乙醇1次，3-5min→75％乙醇1次，3-5min→ 蒸馏水洗2次，每次3-5min。 b. 抗原修复：将切片浸泡在枸橼酸修复液中，95-100℃加热约15min (加热时间可以控制在10-20min内，佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。枸橼酸修复液使用需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30min 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片： 用免疫染色洗涤液洗涤切片5min。将切片浸泡在枸橼酸修复液中，95-100℃加热约15min (加热时间可以控制在10-20min内，佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。枸橼酸修复液使用需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30min内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 注意事项 ：抗原修复过程可以使用尚宝的的抗原修复盒进行操作。