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技术文章
糖原PAS染色液试剂盒(过碘酸-雪夫染色液试剂盒)
点击次数:27 发布时间:2023/2/6 14:33:48
产品货号:R23219
产品规格:4×50ml/4×100ml
产品简介:
糖原染色是病理学中常规的染色方法,McManus在1946年使用PAS技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
氧化剂能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于氧化剂还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好氧化剂的浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
本糖原PAS染色液的特点:采用尚宝特有配方技术,大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需1h左右。
产品组成:
试剂名称 | 4×50ml | 4×100ml | 保存条件 |
试剂(A):氧化剂 | 50ml | 100ml | 2-8℃,避光 |
试剂(B):Schiff Reagent | 50ml | 100ml | 2-8℃,避光 |
试剂(C):苏木素染色液 | 50ml | 100ml | 室温,避光 |
试剂(D):酸分化液 | 50ml | 100ml | 室温 |
自备材料:
1. 10%福尔马林固定液
2. 蒸馏水
3. 乙醇
操作步骤(仅供参考):
1. 常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。
2. 石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
3. 自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。
4. 置于氧化剂中,室温(25-30℃)放置5~8min,一般不宜超过10min。
5. 自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。
6. 样本放入Schiff Reagent,置于室温(25-30℃)阴暗处,浸染10~20min。
7. 自来水冲洗10min。
8. 样本置于苏木素染色液中,染细胞核1~2min。
9. 酸性分化液分化2~5s。
10. 自来水冲洗10~15min后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
11. 逐常规乙醇脱水。 二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:
PAS反应阳性物质 | 红色或紫红色 |
细胞核 | 蓝色 |
细胞质 | 深浅不一的红色 |
备注: 颜色深浅很大程度上取决于样品在氧化剂溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
阴性对照 (可选) :
1. 取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3) 100ml,处理30~60min,与其他切片共同入氧化剂。结果应为阴性。
2. (备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他切片共同入氧化剂。结果应为阴性。
3. (备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过氧化剂这一步,直接入Schiff Reagent。结果应为阴性。
注意事项:
1. 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。
2. 氧化剂氧化时间不宜过久,氧化时的温度为18~22℃。
3. 氧化剂和Schiff Reagent应置于2-8℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。使用,提30min取出恢复到在室温后,避光暗处使用。
4. 酸性分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
5. 在氧化剂和Schiff Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织的类别等决定。
6. 本染色液常用于常规组织切片染色,对于真菌、细胞、其薄的切片,建议采购糖原PAS染色试剂盒(细胞真菌用),因为其氧化剂和苏木素溶液浓度更低,不宜过染。
7. 冻切片染色时间尽量要短。
8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。
原创作者:上海尚宝生物科技有限公司