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上海尚宝生物科技有限公司 主营产品:生物专业领域内的技术研究,健身器材,日用百货,生物实验仪器

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技术文章

糖原PAS染色液试剂盒(过碘酸-雪夫染色液试剂盒)

点击次数:27 发布时间:2023/2/6 14:33:48

糖原PAS染色液试剂盒(过碘酸-雪夫染色液试剂盒)

产品货号:R23219

产品规格:4×50ml/4×100ml

产品简介:

糖原染色是病理学中常规的染色方法,McManus1946年使用PAS技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。

氧化剂能氧化糖类及有关物质中的12-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于氧化剂还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好氧化剂的浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。

本糖原PAS染色液的特点:采用尚宝特有配方技术,大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需1h左右。

产品组成:

试剂名称

4×50ml

4×100ml

保存条件

试剂(A):氧化剂

50ml

100ml

2-8,避光

试剂(B):Schiff  Reagent

50ml

100ml

2-8,避光

试剂(C):苏木素染色液

50ml

100ml

室温,避光

试剂(D):酸分化液

50ml

100ml

室温

自备材料:

1. 10%福尔马林固定液

2. 蒸馏水

3. 乙醇

操作步骤(仅供参考)

1. 常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。

2. 石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。

3. 自来水冲洗23min,再用蒸馏水浸洗2次。

4. 置于氧化剂中,室温(25-30℃)放置58min,一般不宜超过10min

5. 自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。

6. 样本放入Schiff Reagent,置于室温(25-30℃)阴暗处,浸染1020min

7. 自来水冲洗10min

8. 样本置于苏木素染色液中,染细胞核12min

9. 酸性分化液分化25s

10. 自来水冲洗1015min后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。

11. 逐常规乙醇脱水。 二甲苯透明,中性树胶封固。

染色结果:

PAS反应阳性物质

红色或紫红色

细胞核

蓝色

细胞质

深浅不一的红色

备注: 颜色深浅很大程度上取决于样品在氧化剂溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。

阴性对照 (可选)

1. 取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3) 100ml,处理3060min,与其他切片共同入氧化剂。结果应为阴性。

2. (备选方案)取唾液片(过滤后用)处理3060min,与其他切片共同入氧化剂。结果应为阴性。

3. (备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过氧化剂这一步,直接入Schiff Reagent。结果应为阴性。

注意事项:

1. 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。

2. 氧化剂氧化时间不宜过久,氧化时的温度为1822℃

3. 氧化剂和Schiff Reagent应置于2-8密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。使用,提30min取出恢复到在室温后,避光暗处使用。

4. 酸性分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。

5. 在氧化剂和Schiff Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织的类别等决定。

6. 本染色液常用于常规组织切片染色,对于真菌、细胞、其薄的切片,建议采购糖原PAS染色试剂盒(细胞真菌用),因为其氧化剂和苏木素溶液浓度更低,不宜过染。

7. 冻切片染色时间尽量要短。

8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。

 

原创作者:上海尚宝生物科技有限公司

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