产品货号：T10417

产品规格：100ml/500ml

产品简介：

正常精液是一种混合物，在射精时由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子与列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，终射出的混合物是一种粘稠的液体。精子分析的方法有很多，其中可通过培养进行检测。

精子细胞BWW培养基又称为获能培养液（capacitatingmedium），主要由系列盐离子、酚红、葡萄糖、丙酮酸钠、BSA等以及抗生素组成，每1000ml BWW培养基中含100，000U青霉素钠盐和100mg链霉素，是一种旨在用于广谱动物和人体精子细胞获能处理的常用营养液。其标准化成分配方依据Biggers-Whitten-Whittingham

(BWW)研究小组在1971年发表的成果，适合于各种动物和人体精子细胞处理，该试剂经无菌处理。

产品组成：

自备材料：

1. 无菌离心管

2. 离心机

3. 细胞培养箱

操作步骤(仅供参考):

1. 取干净的精液样本室温放置30-60min，使之充分液化。

2. 制备精子细胞(仅供参考，不是必须步骤)：

1)、上泳法：取一个无菌的15ml锥底离心管，加入1ml液化的精液，在其上方轻轻加入Earle培养液1.2ml，45°倾斜试管，37℃孵育1h。轻轻竖立试管，取出上层的1ml液体。加入8ml增补的Earle培养液稀释，500g离心 5min，弃上清。加入Earle培养液0.5ml重新悬浮细胞，用于精子密度或功能的评估。

2)、非连续密度梯度法：取一个无菌的15ml锥底离心管，加入3ml 80%的Percoll。轻轻加入3ml 40%的Percoll于80%的Percoll液面上，小心操作，不要打乱两种液体的界面。轻轻加入1-2ml精液于梯度溶液上，500g离心20min，弃上清。将管底的精子团重新悬浮于5-10ml的Earle培养液中，500g离心5min，弃上清。加入1ml Earle培养液，重新悬浮。

3. 将含有精子细胞的离心管置于37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱中孵育1h。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。

4. 500g离心精子悬液5min，使精子细胞密度接近于10×10⁶/ml，将精子重悬于0.5-1ml精子细胞BWW培养基中，并在37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱内孵育18-24h。

如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，将试管20°倾斜。

注意事项：

1. 注意无菌操作，尽量避免污染。

2. 如无Earle培养液和增补的Earle培养液，可用精子细胞BWW培养基代替。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司