支链淀粉含量检测试剂盒（微量法）

产品货号：BA1924

产品规格：100T/96S

产品简介：

支链淀粉又称胶淀粉，一般由几千个葡萄糖残基组成，淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品 的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响。

支链淀粉和碘形成红紫色络合物，利用乙醇分开样本中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到支链淀粉含量。

技术指标：

di检出限：0.0193mg/mL

线性范围：0.025-1mg/mL

注意：实验之建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

产品组成：

溶液的配制：

1. 试剂二：C₂H₅OC₂H₅100mL自备。

2. 试剂四：提供125mL空瓶一个；将试剂三：H2O =9mL：91mL混匀，现用现配，2-8℃保存半年。

3. 标准品：10mg支链淀粉。临用加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10mg/mL的支链淀粉，2-8℃保存半年。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、C₂H₅OC₂H₅、无水乙醇、EP管。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 称取0.005g烘干样本，加入1mL试剂一，充分匀浆；

2. 80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀；

3. 在步骤2沉淀中加入1mL试剂二（C₂H₅OC₂H₅）振荡5min；3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀；

4. 在步骤3沉淀中加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清待测。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节双波长至530nm和755nm，分光光度计蒸馏水调零。

2. 标准液的稀释：将10mg/mL的标准溶液用试剂四稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05mg/mL标准溶液待测。

3. 标准液稀释可参考下表。

备注：实验中每个标准管需40µL标准溶液。

4. 操作表：(在1.5mL离心管中或96孔板中依次加入下列试剂)：

三、支链淀粉含量计算

1. 标准曲线的建立：

以支链淀粉标准溶液浓度为x轴（x，mg/mL），标准溶液对应的ΔA标准为y轴（y，ΔA标准），建立标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到 x（mg/mL）。

2. 支链淀粉含量（mg/g 质量）=x×V样总÷W=5x÷W

V样总：加入试剂四体积，5mL；W：样本质量，g。

注意事项：

1. 反应后建议在20min内检测完成防止褪色。

2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司