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上海尚宝生物科技有限公司 主营产品:生物专业领域内的技术研究,健身器材,日用百货,生物实验仪器

当前位置:易推广>上海尚宝生物科技有限公司>技术文章>血氨含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明书

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技术文章

血氨含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明书

点击次数:13 发布时间:2023/12/1 15:35:11

血氨含量检测试剂盒(可见分光光度法)

产品货号:BA1888

 

产品规格:50/48

 

产品简介:

血氨主要来源是内源性氨和外源性氨。氨在血中保持恒定状态,即血氨的来源和去路保持动态平衡。氨是有毒物质,主要在肝脏进行代谢解毒。当肝功能严重损害时,氨不能被解毒。氨在中枢神经系统聚集,从而导致肝性脑病。

本法根据氨的靛酚蓝反应原理,通过蛋白沉淀剂将血清(浆)中蛋白沉淀后,利用酚-次氯酸盐直接显色法测定血氨,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比,在630nm处有特殊吸收峰,据此可由吸光值计算出样本中血氨的含量。本试剂盒可测各种动物血清(浆)等样本中血氨的含量,样本禁止溶血。

 

Blood Ammonia                        Indophenol Blue (630nm)  

               

    

技术指标: 

zui低检出限:0.0258μmol/mL

线性范围:0.125-3μmol/mL

注意:实验之建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

 

产品组成:

试剂名称

规格

保存条件

提取液一

液体40mL×1

2-8℃

提取液二

液体40mL×1

2-8℃

试剂一A

液体7mL×1

2-8℃

试剂一B

液体28mL×1

2-8℃

试剂二

液体35mL×1

2-8℃

标准品

液体1mL×1

2-8℃

溶液的配制:

1. 试剂二:临用将A液与B液按照体积比1:4混匀,根据试验所需量现配现用;

2. 标准品:100μmol/mL氮标准液。

 

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、蒸馏水、EP管。

 

适用范围:

本试剂盒可测各种动物血清(浆)等样本中血氨的含量,样本禁止溶血。

 

 

操作步骤 (仅供参考)

一、测定步骤

1. 分光光度计预热30min以上,调节波长至630nm,蒸馏水调零。

2. 标准品的准备:将100µmol/mL的氮标准液用蒸馏水稀释至3210.50.250.125µmol/mL的标准溶液备用。标准溶液稀释可参考下表。

序号

稀释浓度(µmol/mL

标准液体积(µL

蒸馏水体积(µL

稀释后浓度(µmol/mL

1

100

100

900

10

2

10

300

700

3

3

10

200

800

2

4

2

500

500

1

5

1

500

500

0.5

6

0.5

500

500

0.25

7

0.25

500

500

0.125

备注:试验中需标准品200µL

3. 操作表:(在1.5mLEP管中操作)

试剂名称(µL

空白管

测定管

标准管

血清(浆)

-

200

-

标准品稀释液

-

-

200

蒸馏水

200

-

-

提取液一

500

500

500

提取液二

500

500

500

充分混匀,3500 rpm离心10 min,取上清待测

上清液

400

400

400

试剂一

400

400

400

试剂二

400

400

400

1mL反应液,于1mL玻璃比色皿中测定630nm处吸光值A,分别记为A空白管、A测定管、A标准管。计算ΔA= A测定管-A空白管,ΔA标准= A标准管-A空白管。标准曲线和空白管只需测1-2 次。

二、血氨含量计算

1. 标准曲线的绘制:

根据标准管的浓度(xµmol/mL)和吸光度ΔA标准(yΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔAyΔA)带入公式计算样本浓度(xμmol/mL)。

2. 血氨含量的计算:

血氨含量(μmol/mL= x×V÷V= x

V样:加入的样本体积,0.2mL

 

注意事项:

1. 同一批检测样本需配1-2个空白管。

2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

3. 试剂一配制后尽快使用,若发现变色则不能使用。

4. 所用器材和取血装置均应无氨;采血后应立即测定,不能立即测定2-8℃可保留2h

 

原创作者:上海尚宝生物科技有限公司

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