组织铁含量检测试剂盒（可见分光光度法）

产品货号: BA1886

产品规格: 50管/48样

产品说明：

铁是人体必须的微量元素，它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分，帮助氧的运输，促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱，并影响机体的免疫功能。

亚硫酸钠还原Fe³⁺生成Fe²⁺，Fe²⁺进一步与2, 2’-联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长吸光度即可计算铁含量。

技术指标：

zui低检出限：0.00009449 μmol/mL

线性范围：0.0039-0.25 μmol/mL

注意：实验之建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

产品组成：

溶液的配制：

1. 试剂一：临用配制，取1瓶加入7.5mL蒸馏水充分溶解，试剂一变黑后则不能使用，2-8℃保存一周；

2. 试剂二：临用配制，取1瓶加入375μL冰醋酸，加入12mL蒸馏水充分溶解；溶解后2-8℃保存一周；

3. 标准液：1 μmol/mL Fe³⁺标准液。

4. 标准溶液的稀释：临用取100μL 1 μmol/mL Fe³⁺标准液，加入700μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.125μmol/mL的标准溶液进行实验，现用现配。（实验中每管需要400μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、CHC13、冰乙酸、冰和蒸馏水。

操作步骤（仅供参考）：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。4000g 4℃离心10分钟，取上清。

二、测定步骤

1. 可见分光光度计预热30min，波长调至520nm。蒸馏水调零。

2. 加样表：

三、组织铁含量计算

1. 按组织质量计算：

组织铁含量（μg/g 质量）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷W

= 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W

2. 按组织蛋白浓度计算

组织铁含量（μg/mg prot）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷（Cpr×V提取）

= 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr

C标准液：0.125μmol/mL Fe³⁺标准液；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V提取：提取液体积， 1mL；55.845：Fe的相对分子质量，55.845μg/μmol。

注意事项：

1. 当ΔA大于0.9时，建议将样本用提取液稀释后进行测定；ΔA过小时，可增加加入的样本体积来测定。

2. 试剂一溶解变黑后则不能使用；试剂二有毒性，做好防护措施。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司