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人26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)elisa试剂盒安徽省elisa试剂盒厂家
点击次数:22发布时间:2021/4/13 14:07:27
更新日期:2024/9/30 9:36:54
所 在 地:中国大陆
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详细内容
人26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)elisa试剂盒
目的研究脊髓星形胶质细胞D-型氨基酸氧化酶(DAAO)/H2O2介导吗啡镇痛耐受的神经生物学作用.方法在全身或脊髓鞘内连续7 d注射吗啡建立吗啡耐受动物模型的同时长期给予或单次给予DAAO抑制剂或沉默脊髓DAAO基因siRNA后,进行5%福尔马林刺激,考察在小鼠或大鼠福尔马林(第Ⅰ相急性疼痛和第II相中枢敏感化疼痛),热板和甩尾疼痛模型中吗啡镇痛作用耐受性的变化.结果皮下或脊髓联合给予吗啡和系列结构不同的DAAO抑制剂如CBIO,AS057278和苯甲酸钠,在小鼠/大鼠急性疼痛(热板,甩尾)和福尔马林疼痛模型(第I相急性疼痛和第II相中枢敏感化疼痛)能完全预防吗啡对镇痛的耐受作用,单次剂量可完全逆转已形成的吗啡耐受状态,且DAAO抑制剂预防和逆转吗啡镇痛耐受作用与脊髓DAAO活性抑制成正性相关;脊髓注射siRNA/DAAO完全预防吗啡耐受;吗啡疼痛耐受形成后,脊髓过氧化氢升高15.1%;同时脊髓给予ROS非特异性清除剂PBN亦可完全阻断福尔马林II相疼痛和吗啡镇痛耐受状态.结论脊髓星形胶质细胞DAAO通过生成过氧化氢介导吗啡镇痛耐受性的形成,是阻断吗啡耐受的个潜在性新靶点分子,为吗啡镇痛耐受揭示条新的传导通路.本研究结果还表明DAAO至少是脊髓星形胶质细胞介导吗啡镇痛耐受的分子之,为开发DAAO抑制剂作为新型镇痛药物以及单独使用或与吗啡合用拮抗吗啡耐受提供了药理学基础.
性能特点
人26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)elisa试剂盒
α-氨基酸对于生命过程研究和生物医药开发有重要意义.α-氨基酸是蛋白质的主要组分,是生物体中重要的氨基酸,而所有人体内组成蛋白质的氨基酸则都是α-氨基酸.自然界存在的20种氨基酸中,除甘氨酸外,α-氨基酸都是手性的,它们各自发挥着其独特的功能,与人们的生存,生命息息相关.然而,天然氨基酸数目有限,非天然氨基酸则多为外消旋体,且D-型和L-型对映体的生理作用迥异. 本文通过生物催化的方法对外消旋的α-氨基酸进行手性拆分.生物催化中常用的有机体主要是微生物,其本质是利用微生物细胞内的酶进行催化,促进生物转化的进程.酶催化的反应对底物具有高度立体的特性,这种性质可用于使外消旋体中的某异构体参加酶促反应,被消耗为另物质,而另异构体不受影响,但性质与消耗后形成的物质明显不同,使利用般物理分离方法将两个对映体的拆分变为可能. 本文实验过程主要分为三个方面: 1.通过对微生物的筛选确定各类微生物对α-氨基酸的手性选择:选取DL-Met为反应底物,通过对多种微生物菌株的筛选,进行D-Met和L-Met的拆分,从中筛选出具有高选择性和高效率的菌株. 2.选取纤细酵母菌(Rhodotorula graminis, R. g.)作为反应菌株,并对R.g.提供的LAAO进行底物特异性和反应机理等进行研究. 3.选取气单胞(Aeromonas sp.)和破壁后的HP0203菌(hpDAAO)作为反应菌株,提供D-氨基酸氧化酶(DAAO),分别对其底物的特异性,反应机理等进行研究.
工作原理
人26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)elisa试剂盒
D-氨基酸氧化酶(DAAO)催化D-型氨基酸生成其对应的α-酮酸,并伴有副产物过氧化氢产生(H2O2)。在该实验中,D-氨基酸氧化酶被修饰连接上段类弹性蛋白(ELP),并将该已修饰的酶蛋白固定到多壁碳纳米管上(MWCNTs)。多壁碳纳米管先被羟高铁血红素(hematin)所修饰,再将ELP修饰的DAAO (ELP-DAAO)固定到已在碳纳米管上的hematin上,这种定向的固定方式使的ELP-DAAO分子和hematin分子在空间上以分子水平上的距离相靠近。这种分子距离上的靠近使的ELP-DAAO催化产生的H2O2能迅速地被hematin所分解。同时,生成的氧气(O2)又充分地被用来氧化DAAO的辅酶还原态的黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),并产生H2O2。从而在ELP-DAAO和hematin之间形成个从H2O2→O2→H2O2的循环。实验结果表明,该循环作为催化体系的推动力加速主反应的进行。从酶的动力学研究结果可以看出,ELP-DAAO/hematin-CNT催化体系所展现的催化效率是游离ELP-DAAO的三倍多。由此,我们的研究成功构建了个高效的模拟多酶催化的体系。另外,实验过程中对于该催化体系的构建,运用到了高分辨透射电镜(TEM)、红外光谱(FT-IR)、紫外可见光光谱(UV-vis)、X-射线电子能谱(XPS)等手段对其进行了全程表征,实验结果充分的表明了该催化体系被成功地构建了。后,对于该种高效的酶固定催化体系的进步研究。方面关于固定载体,我们可以用其它的纳米或微米材料来替代MWCNTs。另方面对于在本实验中用到的DAAO也可以被其它的氧化酶来替换,从而形成更多更广泛的模拟多酶催化体系。
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人26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)elisa试剂盒
厦门仑昌硕生物科技有限公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为体的生物技术公司,目可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清,动物抗血清等高品质产品及服务,涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学域