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测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。仅用于科研
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
试剂使用须知:
(1)请参照相关法规、文献、MSDS等信息,理解并掌握好试剂的特性,再进行安全操作。
(2)通常购买试剂时一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话,更加注意其他保管和管理。
(3)万一试剂操作者并非业技术人员。必须在业人士的指导监督下进行操作。对于使用后的废弃物,不要或者旧的试剂,应按照相关法律法规正当处理。
(4)购买后,请务必确认标签上的注意事项;做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制;在使用再次确认标签上的注意事项,做好必要的安全对策;对没有标明其危害特性、有害特性的,也要慎重地进行操作;必须带好防护用具,小心翼翼进行操作。
碳水化合物磺基转移酶14抗体
碳水化合物磺基转移酶2抗体
碳水化合物磺基转移酶3抗体
碳水化合物磺基转移酶5抗体
碳水化合物磺基转移酶6抗体
染色质修饰蛋白CHMP7抗体
软骨凝集蛋白CHODL抗体
胆囊收缩素39抗体
乙醇胺激酶α抗体
阳离子通道精子相关蛋白4抗体
胞浆动力蛋白中间链1抗体
胞浆动力蛋白中间链2抗体
抑癌蛋白DKK3抗体
肿瘤坏死因子配体超家族成员10C
干扰素诱导蛋白p58ipk抗体
转录调节因子DACH2抗体
穿膜蛋白DLK1抗体
Dysferlin蛋白抗体
防御素β2/Defensin β2抗体
死亡相关蛋白5抗体
解旋酶DEAD5抗体
细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体
Caspase 激活的脱氧核糖核酸酶抗体
死亡效应结构域蛋白1抗体
死亡效应结构域蛋白2抗体