本试剂仅供研究使用       
目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）的含量。

 人可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）检测试剂盒@技术文章 

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）水平。用纯化的人可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入人可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）含量。

 人可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）检测试剂盒@技术文章 

试剂盒组成：

注：标准品浓度依次为：80、40、20、10、5、0 ng/ml.

样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。

4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

5. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。

7. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 

8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

9. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 

注意事项：

1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用也要在室温平衡60分钟。

2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物请避光保存。

7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9． 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，    

在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD      

值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释      

倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标      

准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值      

代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释      

倍数，即为样品的实际浓度。                  

试剂盒性能：

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。

检测范围：                                            

2.5 ng/ml - 80 ng/ml

灵敏度：                                            

检测浓度小于0.1 ng/ml 

保存条件及期：

1.试剂盒保存： 2-8℃。

2．期： 6个月
相关产品：

人疱疹病毒7型(HHV-7)elisa试剂盒@工作原理HHV-7试剂盒,疱疹病毒型检测试剂盒,人疱疹病毒7型(HHV-7)elisa试剂盒
人阿米巴痢疾(EH)elisa试剂盒@说明书EH试剂盒,阿米巴痢疾检测试剂盒,人阿米巴痢疾(EH)elisa试剂盒
人H-Y TCR抗体(H-Y TCR-Ab)elisa试剂盒@技术文献H-Y TCR-Ab试剂盒,HYR检测试剂盒,人H-Y TCR抗体(H-Y TCR-Ab)elisa试剂盒
人补体成分1q子成分C(C1qC)elisa试剂盒@现货C1qC试剂盒,补体成分q子成分检测试剂盒,人补体成分1q子成分C(C1qC)elisa试剂盒
人腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)elisa试剂盒@代测服务AHCY试剂盒,腺苷高半胱氨酸酶检测试剂盒,人腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)elisa试剂盒
人抑肽酶(AP)elisa试剂盒@工作原理AP试剂盒,抑肽酶检测试剂盒,人抑肽酶(AP)elisa试剂盒
人S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)elisa试剂盒@说明书SAHH试剂盒,腺苷同型半胱氨酸水解酶检测试剂盒,人S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)elisa试剂盒
人唾唾液酸结合Ig样凝集素14(SIGLEC14)elisa试剂盒@技术文献SIGLEC14试剂盒,唾唾液酸结合样凝集素检测试剂盒,人唾唾液酸结合Ig样凝集素14(SIGLEC14)elisa试剂盒
人抗高迁移率族蛋白B1抗体(anti-HMGB-1)elisa试剂盒@现货anti-HMGB-1试剂盒,抗高迁移率族蛋白检测试剂盒,人抗高迁移率族蛋白B1抗体(anti-HMGB-1)elisa试剂盒
人溶血磷脂酰丝氨酸(LysoPS)elisa试剂盒@代测服务LysoPS试剂盒,溶血磷脂酰丝氨酸检测试剂盒,人溶血磷脂酰丝氨酸(LysoPS)elisa试剂盒
人Ser；Thr蛋白磷酸酶(PP5)elisa试剂盒@工作原理PP5试剂盒,rhr蛋白磷酸酶检测试剂盒,人Ser；Thr蛋白磷酸酶(PP5)elisa试剂盒
人桥粒斑蛋白(DSP)elisa试剂盒@说明书DSP试剂盒,桥粒斑蛋白检测试剂盒,人桥粒斑蛋白(DSP)elisa试剂盒
人结核分枝杆菌MPT64蛋白(MPT64)elisa试剂盒@技术文献MPT64试剂盒,结核分枝杆菌蛋白检测试剂盒,人结核分枝杆菌MPT64蛋白(MPT64)elisa试剂盒
人血栓烷受体(TP)elisa试剂盒@现货TP试剂盒,血栓烷检测试剂盒,人血栓烷受体(TP)elisa试剂盒
人病毒白介素IL-10(vIL-10)elisa试剂盒@代测服务vIL-10试剂盒,病毒白介素检测试剂盒,人病毒白介素IL-10(vIL-10)elisa试剂盒

原创作者：上海化邦生物科技有限公司