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仓鼠细小病毒(PV)检测试剂盒@相关文献
使用目的:
本试剂盒用于测定仓鼠血清、血浆及相关液体样本中细小病毒(PV)表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中仓鼠细小病毒(PV)表达。用纯化的仓鼠细小病毒(PV)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中细小病毒(PV)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的细小病毒(PV)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中仓鼠细小病毒(PV)的存在与否。
仓鼠细小病毒(PV)检测试剂盒操作步骤
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
仓鼠细小病毒(PV)检测试剂盒操作步骤
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