产品资料

RF/6A;猴脉络膜-视网膜内皮细胞

产品简介

细胞英文(简称）	RF/6A
细胞名称	RF/6A;猴脉络膜-视网膜内皮细胞
背景资料	这个细胞株在早期自发转化并已传代540次以上。电镜下观察到Weibel-Palade颗粒。高代次的细胞用作滋养层以增强贴壁，转接能力和供养眼色素层黑素细胞。
细胞来源	ATCC
代次	P3
规格	冻存（1×10^6/管 发2管） 或 复苏（T25一瓶）
细胞数	1x10^6 cells
生物安全别	1
组织来源	视网膜
细胞形态	贴壁
细胞活力	95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测	细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件	MEM +10% FBS+1%P/S；37℃，5% CO2
传代方法	次建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件	90%FBS+10%DMSO

注意事项
T25 培养瓶中的细胞操作步骤
1. 75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。
2. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40 ×,100×,200×各一张）三天照片为重要售后依据，不提供或未 拍照默认收到状态良好。
3. 不要打开培养瓶盖，将细胞放入 37 度培养箱中静置 3-4 小时后 再做处理，以稳定细胞状态
 贴壁细胞：若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加 配制好的完全培养基 5-6ml。放到 37 度培养箱培养。待细胞密度到 80%以上，进行传代。
悬浮细胞：将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行 分瓶，密度在 3x10^5/ml 为宜。
注意：初次次传代比例建议 1:2，之后可根据细胞密度和增 殖情况适当调整。 冻存管细胞的操作步骤
1. 收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装 破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。
2. 将细胞取出转移至-80 度冰箱(不超过一周）或液氮保存,建议尽早 复苏。
3. 复苏一管后有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与 您沟通指导后再复苏第二管。
注意：为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻 复苏细胞。

RF/6A;猴脉络膜-视网膜内皮细胞

产品功能
细胞传代
1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养 液，用 PBS 清洗细胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观 察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化，再轻轻吹打 细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；
3. 弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进 行分瓶传代，后放入 37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
细胞复苏
1. 从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其 置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦 拭冻存管外壁；
2. 将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3. 弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2培养瓶，于 37℃， 5%CO2细胞培养箱中培养；
4. 第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
细胞冻存
1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养 液，用 PBS 清洗细胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观 察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使 之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；
3. 用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻 存管中；
4. 先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
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