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紫草PCR鉴定试剂盒
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产品数:14478
参观次数:1190451
详细内容
产品特点
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,一性强,只扩增紫草,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
参数规格
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
试剂三 | 紫草PCR鉴定引物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 紫草PCR鉴定阳性对照(1×10E8/μL) | 50 μL(黄盖) |
试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL紫草PCR鉴定阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
紫草PCR鉴定引物混合液 | 各 2μL | 2μL | 2μL |
N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
PCR 阳性对照(紫草PCR鉴定阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
4.按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应(35 个循环) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
PCR检测试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断,不得用于其他用途。
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