当前位置：易推广 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > PCR检测试剂盒 > 上海通蔚实业有限公司 > 产品展示 > PCR试剂盒 > 探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 > 羊边界病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

羊边界病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

点击查看大图

价格：￥电议

品牌名称：通蔚生物(进口品牌)型号：原产地：中国大陆发布时间：2023/7/25 15:13:01更新时间：2024/8/2 10:38:02

产品摘要：羊边界病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据羊边界病病毒高度保守区设计，不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量RT-PCR反应，本产品只能用于科研。

产品完善度：访问次数：155

企业档案

会员类型：初级版会员

已获得易推广信誉等级评定

10成长值

(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问

(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈

(91+ )优质信誉积累，可持续信赖

易推广初级版会员：3年

工商认证【已认证】

最后认证时间：

注册号：【已认证】

法人代表：【已认证】

企业类型：经销商【已认证】

注册资金：人民币万【已认证】

产品数：14478

参观次数：1178923

手机网站：http://m.yituig.com/c162640/

商铺地址：http://www.tw-reagent.com

详细内容

羊边界病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品特点

羊边界病病毒(BorderDiseaseVirus，BDV)会引起羊边界病，是新生羔羊以身体多毛、生长不良和神经异常为主要特征的一种先天性传染病。边界病病毒的临诊表现主要取决于宿主的年龄。临诊疾病限于在怀孕期受到感染的新生或年幼羔羊。如一个羊群受到感染时，主要表现在繁殖季节不孕或流产增多，流产可发生于怀孕的任何时期，但以怀孕后 90 天左右为多。由于胎儿的严重畸型导致脊柱后侧凸或关节变曲而表现为难产。边界病病毒呈性分布，大多数饲养绵羊国家都有本病的报道，因此灵敏快捷的诊断产品具有重要的意义。本产品以探针法荧光定量 RT-PCR 技术为基础开发的门检测羊边界病病毒的试剂盒，

它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品 RNA 模板。

2. 引物和探针经过优化，灵敏性高。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，引物是根据羊边界病病毒高度保守区设计，不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。

6. 本产品只能用于科研。

参数规格

编号	成分	规格
试剂一	探针法 qRT-PCR 缓冲液	500 μL（蓝盖）
试剂二	探针法 qRT-PCR 酶混合液	100 μL（红盖）
试剂三	荧光 PCR 用模板稀释液	1 mL（黄盖）
试剂四	羊边界病病毒探针法qRT-PCR引物混合液	100 μL（白盖）
试剂五	羊边界病病毒 qRT-PCR 探针	50 μL（棕色管）
试剂六	羊边界病病毒探针法qRT-PCR阳性对照(1×10E8/μL)	50 μL（黄盖）
使用手册		1 份

运输及保存：

低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。

自备试剂：

样品 RNA。

使用方法

一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）：

由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。

1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 RT-PCR 用模板稀释液，好用带芯枪头，下同）。

3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品 RNA 的制备：

7. 如果有 N 个样品，好设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为 NC。

8. 用自选方法纯化样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒 RNAout。

三、Probe qRT-PCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）：

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于 PCR 阳性对照（用第 4 号管的阳性对照稀释液做模板）。下面只以定量分析为例描述操作步骤。

10. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后后加）：

成份	样品管 N+2个	RT-PCR阴性对照管	标准曲线样品管 (2-7管)
探针法 qRT-PCR 缓冲液	各 10 μL	10 μL	各 10 μL
探针法 qRT-PCR 酶混合液	各 2 μL	2 μL	各 2 μL
羊边界病病毒 qRT-PCR 探针	各 1 μL	1 μL	各 1 μL
羊边界病病毒探针qRT-PCR引物混合液	各 2 μL	2 μL	各 2 μL
待测样品 RNA 模板	各 5 μL	－－	－－
超纯水	－－	5 μL	－－
第7步所得标准曲线样品稀释液（2-7号）	不加	不加	各5 μL (2号样到2号管，3号样到3号管)

11. 盖上盖子后上机，按下面参数进行 qRT-PCR：

过程	温度	时间
逆转录	50℃	30 min
预变性	94℃	10 min
qRT-PCR反应(35个循环)	94℃	15 sec
qRT-PCR反应(35个循环)	60℃	1 min，(采集FAM通道的荧光信号)

羊边界病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒
四、数据处理：

12. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品RNA 浓度的 log 值，再推算出其浓度。

13. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 40，则为阳性。
羊边界病病毒探针法RT-PCR试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断，不得用于其他用途。

返回顶部

点击询价

联系方式