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总抗氧化能力(FRAP法)检测试剂盒/微量法
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品牌名称：通蔚生物(进口品牌)型号：100T/96S 原产地：中国大陆 发布时间：2023/8/1 15:05:27更新时间：2024/8/2 10:38:15
产品摘要：总抗氧化能力(FRAP法)检测试剂盒/微量法测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。在酸性环境下，抗氧化物质还原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的 Fe2+-TPTZ的能力反映了总抗氧化能力。
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详细内容
总抗氧化能力(FRAP法)检测试剂盒/微量法
注意事项
正式测定之选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
正式测定之选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
在酸性环境下，抗氧化物质还原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。
自备实验用品：
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体 120mL×1 瓶，使用预冷。
试剂一：液体 20 mL×1 瓶，避光保存。
试剂二：液体 2 mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体 2 mL×1 瓶，避光保存。
混合液(现配现用)：将试剂一、试剂二、试剂三按 10:1:1 的比例混合，使用 37℃预温。
样品的制备：
(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用 EDTA 抗凝）4℃，5000rpm 离心10min，取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30d）后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎（功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
总抗氧化能力(FRAP法)检测试剂盒/微量法
操作步骤：
1、 酶标仪预热 30min，调节波长至 593nm。
2、操作表
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| 空白管 | 测定管 |
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| 样品（μL） |
| 10 |
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| 提取液（μL） | 10 |
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| 混合液（μL） | 190 | 190 |
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充分混匀，反应 20min，于 96 孔板，测定 593nm 吸光值，△A= A 测定-A 空白
注意：空白管只需测定一次，若测定管吸光值大于 1.5 则需要用提取液稀释。
总抗氧化能力计算公式：
标准曲线：y = 1.2416x + 0.0134R2 = 0.9996x:Trolox 浓度(μmol/mL) y:吸光值差值△A
单位定义:用从标准曲线上获得的抗氧化剂 Trolox 的量来表示样本的总抗氧化能力。
（1）按样本质量计算
（1）按样本质量计算
总抗氧化能力（μmol Trolox/g 鲜重）=（△A-0.0134）÷1.2416×V 样÷(V 样÷V 样总×W) =0.8054×（△A-0.0134）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
总抗氧化能力（μmol Trolox/mg prot）=（△A-0.0134）÷1.2416×V 样÷(V 样÷V 样总×Cpr) =0.8054×（△A-0.0134）÷Cpr
（3）按细胞计算
总抗氧化能力（μmol Trolox/104cell）=（△A-0.0134）÷1.2416×V 样÷（V 样÷V 样总×细胞数
量（万个））= 0.8054×（△A-0.0134）÷ 细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
总抗氧化能力（μmol Trolox/mL）=（△A-0.0134）÷1.2416 =0.8054×（△A-0.0134）
V样总：加入提取液体积，1 mL；V 样：反应中样品体积，10μL；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL
注意事项：
1. 试剂二对人体有刺激性，请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴乳胶手套操作。
2. 尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
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