当前位置： 易推广 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > PCR检测试剂盒 > 上海通蔚实业有限公司 > 产品展示 > 生化检测试剂盒 > 生化检测试剂盒/微量法 > 柠檬酸(CA)含量检测试剂盒/微量法
柠檬酸(CA)含量检测试剂盒/微量法
价格：￥电议
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：100管/96样 原产地：中国大陆 发布时间：2023/8/2 11:22:43更新时间：2024/8/2 10:38:15
产品摘要：柠檬酸(CA)含量检测试剂盒/微量法是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。此外，CA是三羧酸循环第，一步反应的产物。酸性条件下，柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。
产品完善度： 访问次数：158
企业档案
会员类型：初级版会员
已获得易推广信誉 等级评定
10成长值
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
易推广初级版会员：3年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
企业类型：经销商 【已认证】
注册资金：人民币万 【已认证】
产品数：14478
参观次数：1193453
详细内容
新品推荐：柠檬酸(CA)含量检测试剂盒/微量法
上架时间：2024/9/2
创新点：全国包邮
柠檬酸(CA)含量检测试剂盒/微量法
注意事项
正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
CA是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。此外，CA是三羧酸循环第，一步反应的产物。
酸性条件下，柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。
自备仪器和用品：
低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配置：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1管，－20℃保存。
试剂四：粉剂×1管，室温保存。临用配制，加入2mL试剂一，充分溶解。
试剂五：液体×1管，4℃避光保存。
标准品：液体×1管，250μmol/L柠檬酸标准液，4℃保存。
样品中柠檬酸提取：
1. 液体样品中柠檬酸提取：取0.1mL液体加试剂一0.9mL，充分混匀，11000g， 4℃离心10min，取上清液，待测。
2. 组织中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
3. 线粒体中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，600g/min，4℃离心5min；取上清至另一EP管中，11000g，4℃离心10min，弃上清（此上清液可用于细胞质CA含量测定）；向沉淀中加试剂二200μl，以及试剂三2μl，充分悬浮溶解，11000g，4℃离心10min，取上清液，待测。
4. 细菌、真菌中：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3，间隔7，总时间3min）；11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
柠檬酸(CA)含量检测试剂盒/微量法
测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到545 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂一置于30℃水浴中预热30min。
3. 空白管：取0.5 mL EP管，依次加入20μL蒸馏水，140μL试剂一，20μL试剂四，20μL试剂五，混匀后室温静置30min，于545nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取0.5 mL EP管，依次加入20μL标准液，140μL试剂一，20μL试剂四，20μL试剂五，混匀后室温静置30min，于545nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 测定管：取0.5 mL EP管，依次加入20μL上清液，140μL试剂一，20μL试剂四，20μL试剂五，充分混匀后室温静置30min，于545nm测定吸光度，记为A测定管。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
计算公式：
a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1. 按液体样品的体积计算
柠檬酸含量（nmol/L）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×样品稀释倍数×V总= 2500×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
C标准液：250μmol/L=0.25 m mol/L；样品稀释倍数：（0.1 mL样品+0.9mL试剂一）÷ 0.1 mL样品=10；V总：1mL。
2. 按组织质量计算
柠檬酸含量（nmol/g 鲜重）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷W= 250×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) ÷W
C标准液：250 μ mol/L；V总：上清液总体积，1.0 mL=0.001 L；W：样品质量，g。
3. 按蛋白含量计算
柠檬酸含量（nmol/mg prot）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]÷Cpr= 250×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) ÷Cpr
C标准液：250 μ mol/L=0.25μ mol/mL；Cpr：上清液蛋白质含量，mg/mL。
4. 按细胞数量计算
柠檬酸含量（nmol/104 cell）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷细胞数量= 250×(A测定管－A空白管) ÷(A标准管－A空白管) ÷细胞数量
C标准液：250 μ mol/L；V总：上清液总体积，1.0 mL=0.001 L；
b. 使用96孔板测定的计算公式如下
1. 按液体样品的体积计算
柠檬酸含量（nmol/L）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×样品稀释倍数×V总= 2500×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
C标准液：250μmol/L=0.25 m mol/L；样品稀释倍数：（0.1 mL样品+0.9mL试剂一）÷ 0.1 mL样品=10；V总：1mL。
2. 按组织质量计算
柠檬酸含量（nmol/g 鲜重）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷W= 250×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) ÷W
C标准液：250 μ mol/L；V总：上清液总体积，1.0 mL=0.001 L；W：样品质量，g。
3. 按蛋白含量计算
柠檬酸含量（nmol/mg prot）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]÷Cpr= 250×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) ÷Cpr
C标准液：250 μ mol/L=0.25μ mol/mL；Cpr：上清液蛋白质含量，mg/mL。
4. 按细胞数量计算
柠檬酸含量（nmol/104 cell）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷细胞数量= 250×(A测定管－A空白管) ÷(A标准管－A空白管) ÷细胞数量
C标准液：250 μ mol/L；V总：上清液总体积，1.0 mL=0.001 L；
注意事项：
1. 样品处理等过程均需要在冰上进行。
2. 试剂四需现配现用，配置好的一周内使用完；
3. 试剂五为易致癌物质，实验过程中，需佩戴手套，避免试剂五溅到皮肤上。
4. 柠檬酸提取液不能用于蛋白含量测定，如需测定蛋白含量，需另取组织，使用本公司BCA试剂盒进行测定。
在线咨询