当前位置： 易推广 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > PCR检测试剂盒 > 上海通蔚实业有限公司 > 产品展示 > 生化检测试剂盒 > 生化检测试剂盒/微量法 > 磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒/微量法
磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒/微量法
价格：￥电议
品牌名称：通蔚生物(进口品牌)型号：100T/48S 原产地：中国大陆 发布时间：2023/8/2 14:58:40更新时间：2024/8/2 10:38:15
产品摘要：磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒/微量法是磷脂sn-2位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。
产品完善度： 访问次数：154
企业档案
会员类型：初级版会员
已获得易推广信誉 等级评定
10成长值
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
易推广初级版会员：3年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
企业类型：经销商 【已认证】
注册资金：人民币万 【已认证】
产品数：14478
参观次数：1190682
详细内容
磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒/微量法
计算公式：
注意事项
正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
磷脂酶A2（EC3.1.1.4）是磷脂sn-2位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱（HEPC）产生游离巯基，与DTNB反应生成黄色物质，在412nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、超速冷冻离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体×5瓶，-20℃避光保存。临用根据用量每瓶加入1.8mL试剂二充分混匀；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
样品处理：
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3，间隔7，总时间3min）；然后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。
3. 血清：直接测定。
磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒/微量法
测定操作：
|
| 对照管 | 测定管 |
| 样品（μL） | 20 | 20 |
| 试剂二（μL） | 180 |
|
| 试剂三（μL） |
| 180 |
| 充分混匀，37℃反应10min，于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定412nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管- A对照管 | ||
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：每毫克蛋白每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/mg prot）= △A÷（×d）×V反总÷（V样×Cpr）÷T= 73.53×△A÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：每克组织每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/g 鲜重）= △A÷（×d）×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T= 73.53×△A÷W
3. 细胞数量计算
酶活性定义：每104个细胞每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/104 cell）= △A÷（×d）×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）÷T= 73.53×△A÷细胞数量
4. 按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升血清每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/mL）= △A÷（×d）×V反总÷V样÷T= 73.53×△A
：TNB消光系数，13600L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，1mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.1mL；W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：每毫克蛋白每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/mg prot）= △A÷（×d）×V反总÷（V样×Cpr）÷T=147.06×△A÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：每克组织每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/g 鲜重）= △A÷（×d）×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T= 147.06×△A÷W
3. 细胞数量计算
酶活性定义：每104个细胞每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/104 cell）= △A÷（×d）×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）÷T=147.06×△A÷细胞数量
4. 按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升血清每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。
PLA2活性（nmol/min/mL）= △A÷（×d）×V反总÷V样÷T= 147.06×△A
：TNB消光系数，13600L/mol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V反总：反应总体积，1mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.1mL；W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
在线咨询