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土壤脲酶(S-UE)检测试剂盒/微量法

价格:¥电议

品牌名称:通蔚生物(进口品牌)型号:100管/48样 原产地:中国大陆 发布时间:2023/8/3 11:46:43更新时间:2024/8/2 10:38:15

产品摘要:土壤脲酶(S-UE)检测试剂盒/微量法S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。

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详细内容

土壤脲酶(S-UE)检测试剂盒/微量法
注意事项
正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:甲苯2mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1瓶,临用加入9mL蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体22mL×1瓶,4℃保存;
试剂四A液:液体×1支,4℃保存;试剂四B液:液体×1瓶,4℃保存;临用将A液倒入B液中混合,待用;用不完的试剂4℃保存一周;
试剂五:液体2mL×1瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
土壤脲酶(S-UE)检测试剂盒/微量法
测定步骤:
1 、培养

 

测定管

对照管

风干土样(g)

0.05

0.05

试剂一(μL)

20

20

振荡混匀,室温放置15min

试剂二(μL)

90

 

蒸馏水(μL)

 

90

试剂三(μL)

190

190

混匀,放入37℃水浴培养24h后,10000g 25℃离心10min,取上清液。
2、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)。
3、测氨量(在微量石英比色皿或96孔板中加入下列试剂)

 

测定管

对照管

稀释后的上清液(μL)

80

80

试剂四μL)

15

15

试剂五(μL)

15

15

充分混匀,室温放置20min

蒸馏水(μL)

90

90

混匀,于578nm处,蒸馏水调零,读吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
脲酶活力计算:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0915x +0.0373;x为标准品浓度(μg/mL),y为吸光值A。
单位的定义:每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(μg/d/g 土样)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反总÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V反总:反应体系总体积:0.3mL;W:样本质量,0.05g。
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.04575x +0.0373;x为标准品浓度(μg/mL),y为吸光值A。
单位的定义:每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(μg/d /g 土样)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反总÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V反总:反应体系总体积:0.3mL;W:样本质量,0.05g。
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