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土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒/微量法

价格:¥电议

品牌名称:通蔚生物(进口品牌)型号:100管/48样 原产地:中国大陆 发布时间:2023/8/3 13:02:31更新时间:2024/12/16 15:27:04

产品摘要:土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒/微量法能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。

产品完善度: 访问次数:159

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详细内容

土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒/微量法
注意事项
正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义           
S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用加入10mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存; 
试剂四:液体15mL×1瓶,4℃保存; 
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒/微量法
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2、加样表

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.02

0.02

试剂一(μL)

10

10

 

室温振荡混匀15min

90℃振荡混匀15min

试剂二(μL)

130

 

蒸馏水

 

130

试剂三(μL)

160

160

混匀, 37℃振荡反应1h后,90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,
10000g 25℃离心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列试剂)

上清液(μL)

70

70

试剂四(μL)

130

130

充分混匀,室温静置2min后, 400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-α-GC活力计算:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
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