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灭鲑气单胞菌PCR试剂盒
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品牌名称：通蔚生物(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2023/8/4 15:36:54更新时间：2024/8/2 10:38:15
产品摘要：灭鲑气单胞菌PCR试剂盒引物经过精心优化，一性强，只扩增灭鲑气单胞菌，与其他病原没有交叉反应。本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
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详细内容
灭鲑气单胞菌PCR试剂盒
灭鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)是气单胞菌属(Aeromonas)细菌的一个种，是引起鲑鳟鱼类疖疮病及溃疡病的主要病原菌，给鲑科(Salmonidae)鱼类养殖带来严重损失。近年来研究表明，该菌宿主范围逐渐扩大，可感染除了鲑科外的其他水产动物，如刺参、斑点叉尾鲙、乌鳢和大菱鲆等。对灭鲑气单胞菌的检测主要依赖于传统的微生物分离培养鉴定方法，其操作过程费时、繁琐，且很难得到准确结果，常常延误病情的诊断，而且对于已感染该菌但尚未发病的鱼类，通过常规分离鉴定方法很难得到准确结果本产品是根据 PCR 原理开发的灭鲑气单胞菌检测试剂盒，
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，一性强，只扩增灭鲑气单胞菌，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 | 灭鲑气单胞菌 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 灭鲑气单胞菌 PCR 阳性对照（1×10E8 /μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 RNA。
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL灭鲑气单胞菌PCR阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 灭鲑气单胞菌PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | －－ | －－ |
| PCR 阴性对照（水） | －－ | 18μL | －－ |
| PCR 阳性对照（灭鲑气单胞菌PCR阳性对照1000倍稀释液） | －－ | －－ | 18μL |
灭鲑气单胞菌PCR试剂盒
4.按下表设置 PCR 反应：
4.按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应35个循环 | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测：
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
PCR检测试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断，不得用于其他用途。
PCR检测试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断，不得用于其他用途。
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